1. | RNase Inhibitor | 40 U/μl | 50 μl |
2. | 10×BAP Buffer | 200 μl | |
3. | Alkaline Phosphatase (BAP) | 20 μl | |
4. | 0.1% BSA | 0.1% | 60 μl |
5. | 3' adaptor *1, *2 | 10 μl | |
6. | T4 RNA Ligation Buffer | 600 μl | |
7. | T4 RNA Ligase | 40 U/μl | 20 μl |
8. | 5×T4 PNK Buffer | 100 μl | |
9. | T4 Polynucleotide Kinase | 10 U/μl | 10 μl |
10. | 5' adaptor *1 | 10 μl | |
11. | 5×RT Buffer | 40 μl | |
12. | dNTP Mixture | 各2.5 mM | 90 μl |
13. | PCR-R & RT-Primer *1, *3 | 50 pmol/μl | 20 μl |
14. | RTase (RNaseH free) | 200 U/μl | 10 μl |
15. | 2×PCR Buffer | 250 μl | |
16. | PCR Primer F *1 | 50 pmol/μl | 10 μl |
17. | TaKaRa Ex Taq HS | 5 U/μl | 10 μl |
18. | Control RNA *4 | 5 pmol/μl | 10 μl |
19. | 3 M Sodium Acetate (pH5.2) | 200 μl |
20. | Dr. GenTLE Precipitation Carrier *5 | 80 μl |
21. | 2×B/W Buffer | 2.7 ml |
22. | Magnosphere MS300/Streptavidin | 100 μl |
23. | RNase-free dH2O | 10 ml |
*1 | 3' adaptor、5' adaptor、PCR Primer FおよびPCR-R & RT-Primerには、Sse8387 Iのサイトが付加されている。PCR産物をSse8387 Iで消化することにより、Pst Iで切断したベクターに組み込むことができる。なお、本キットには制限酵素やクローニング用ベクターなどは含まれていないので、別途用意が必要である。 |
*2 | 3' adaptorはビオチン化されている。 |
*3 | PCR用のreverse primer。逆転写プライマーとしても使用する。 |
*4 | 本キットに添付されているControl RNAは5’末端がリン酸化された21merの合成RNAである。 |
*5 | Genとるくんエタ沈キャリア(製品コード 9094)と同じものである。 |
採水当日に、死菌も含めたリスク評価が可能
レジオネラ属菌の液体培養に使用する培地のベース
レジオネラ属菌用EMA試薬(LC EMA-qPCR法)
レジオネラの検出&定量(16S rRNA遺伝子)