Clontech蛍光タンパク質概説

Clontechでは多彩な蛍光タンパク質製品、Living Colors蛍光タンパク質シリーズとフルーツ蛍光タンパク質シリーズを販売している。これらの蛍光タンパク質は、生きた細胞中で目的タンパク質を追跡するための融合タグ、プロモーター活性をモニターするためのレポーター、細胞全体や細胞内器官など特定の組織を可視化するためのマーカーなどとして利用可能である。in vivoであるいはin situでリアルタイムに利用でき、同じ細胞中や細胞群で2種類以上の蛍光タンパク質を同時に検出することも可能である。Clontechではプラスミド、レトロウイルス、レンチウイルスタイプの製品を用意している。細胞内局在化を観察するために設計されたベクター、プロモーター活性を解析するためのベクター、プロテアソーム活性をモニターするためのベクター、不安定化蛍光タンパク質を搭載したベクターなど特定の用途にご使用いただける製品も販売している。

Clontechの蛍光タンパク質は可視光領域を広範にカバー

ベクターフォーマット

A：	N末端融合発現ベクター、 C末端融合発現ベクター（pFP-N1、pFP-C1；pAcGFP1-N1、pAcGFP1-C1など）
B：	プロモーターレスベクター（pFP-1；pDsRed2-1など）
C：	細胞内小器官標識ベクター（pFP-Structure；pAcGFP1-Actinなど）
D：	細菌発現ベクターまたは遺伝子ソースとして使用（pFP；pZsGreenなど）
E：	Proteasome Sensorベクター（pZsProSensor-1）
F：	IRESベクター（pIRES2-FP；pIRES2-AcGFP1など）

ClontechのLiving Colorsシリーズは、生物学的研究に最も広く使用されている蛍光タンパク質である。本シリーズにはオワンクラゲAequorea coerulescens由来の緑色蛍光タンパク質AcGFP1、ならびに青色から深赤色まで幅広い色調の9種類の造礁サンゴ由来RCFPs（Reef Coral Fluorescent Proteins）が含まれている。AcGFP1とRCFPsは由来する生物種が異なるが、相互に高い配列相同性を示している。HcRed1とDsRed-Monomer以外のRCFPsは、野生型のDsRedと同様に4量体構造を有していると考えられている。

フルーツ蛍光タンパク質は、mRFP1（単量体型のDsRedバリアント）に直接変異を導入して得られた色彩の異なる8種類のバリアントである。mCherryなど7種類の単量体蛍光タンパク質と非常に明るいタンデム2量体のtdTomatoが含まれ、長波長域の蛍光波長（553～649 nm）、安定な発現、融合タンパク質としての有用性が特長である。

Living Colors蛍光タンパク質およびtdTomatoの特性
a：輝度（brightness）＝（Quantum Yield）×（Extinction Coefficient）
Note: HcRed1 is derived from Heteractis crispa reef coral. AmCyan, ZsGreen, ZsYellow and AsRed are derived from Anthozoa reef coral. DsRed-Monomer, DsRed2, DsRed-Express and DsRed-Express2 derive from Discoma sp. reef coral. AcGFP1 derives from Aequorea coerulescens jellyfish.

ClontechではLiving Colors蛍光タンパク質およびフルーツ蛍光タンパク質を一般的な方法で検出するための各種モノクローナル抗体ならびにポリクローナル抗体を販売している。N末あるいはC末融合タンパク質としてin vivoで発現した場合の確認に特に有用である。さらに、各RCFPは異なる遺伝子にコードされたユニークなタンパク質であるため、個々のRCFPを特異的に検出する抗体も利用できる。
各抗体はいずれも特異性を確認し、ロット間で一定の性能を保証するため、入念に試験されている。