NucleoSpin® Microbial DNA

微生物からの高純度なゲノムDNA精製
  • グラム陰性菌、グラム陽性菌、酵母、糸状菌など、広範囲な微生物からゲノムDNAを抽出、精製
  • MN Bead Tubesの使用により効率的に菌体を破砕
  • 迅速、簡単プロトコールで収率良く高純度ゲノムDNAを取得
  • 溶液状のProteinase Kが添付されており、菌体溶解酵素の準備は不要
  • DNA精製に必要な破砕用チューブやProteinase K溶液を含むall-in-oneのキット
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
740235.10

MNA

マッハライ・ナーゲル社
NucleoSpin® Microbial DNA
労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
10回 ¥8,000
説明書・データシート・ベクター情報
U0235A
740235.50

MNA

マッハライ・ナーゲル社
NucleoSpin® Microbial DNA
労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
50回 ¥33,000
説明書・データシート・ベクター情報
U0235B
740235.250

MNA

マッハライ・ナーゲル社
NucleoSpin® Microbial DNA
労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
250回 ¥150,000
説明書・データシート・ベクター情報
U0235C
740786.50

MNA

マッハライ・ナーゲル社
MN Bead Tubes Type A
50回 ¥24,000
旧製品名:NucleoSpin® Bead Tubes Type A 説明書・データシート・ベクター情報
U0786A
740812.50

MNA

マッハライ・ナーゲル社
MN Bead Tubes Type B
50回 ¥18,000
旧製品名:NucleoSpin® Bead Tubes Type B 説明書・データシート・ベクター情報
U0812A
740813.50

MNA

マッハライ・ナーゲル社
MN Bead Tubes Type C
50回 ¥18,000
旧製品名:NucleoSpin® Bead Tubes Type C 説明書・データシート・ベクター情報
U0813A
740469

MNA

マッハライ・ナーゲル社
MN Bead Tube Holder
1個 ¥8,000
説明書・データシート・ベクター情報
U0469A
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製品説明

NucleoSpin Microbial DNAは、グラム陰性菌、グラム陽性菌、酵母、糸状菌などの微生物から高純度にゲノムDNAを抽出、精製するキットである。本製品の操作は、まず、製品に含まれるMN Bead Tubes Type B中のガラスビーズを用いてProteinase Kの存在下で試料を破砕する。この際には一般的な細胞破砕装置を使用することができる。Proteinase Kが含まれているため、新たに菌体溶解酵素を準備する必要はなく、1回の処理で様々な微生物サンプルを破砕することができる。菌体破砕後は、カオトロピック塩の存在下でDNAをカラムに吸着させ、2回の洗浄後、ゲノムDNAを溶出する。迅速、シンプルな操作で、収率良くゲノムDNAを得ることができる。
MN Bead Tubesは、サンプルの種類に適したものを使用する。グラム陰性菌、グラム陽性菌にはキットに含まれるMN Bead Tubes Type B(別売:製品コード 740812.50)がそのまま使用できる。酵母、糸状菌にはMN Bead Tubes Type C(製品コード 740813.50)、土壌、堆積物サンプルにはMN Bead Tubes Type A(製品コード 740786.50)が別途必要である。

(注)本製品の使用には撹拌式細胞破砕装置が必要です。

原理 シリカメンブレン法
形状 ミニスピンカラム
サンプル量 <40 mg 湿菌体
精製サイズ 200 bp~約50 kb
回収量 5~25 μg(30 mg 湿菌体)
サンプルの種類、破砕方法に依存
A260/280 1.6~2.0
溶出液量 100~200 μl
精製時間 35分
結合容量 60 μg

内容

NucleoSpin Microbial DNA(製品コード 740235.10/.50)
・Lysis Buffer MG
・Wash Buffer BW
・Wash Buffer B5 (Concentrate)
・Elution Buffer BE*1
・Liquid Proteinase K
・MN Bead Tubes Type B
・NucleoSpin Microbial DNA Columns
・Collection Tubes (2 ml)
*1 組成:5 mM Tris-HCl, pH8.5

MN Bead Tubes Type A(製品コード 740786.50)*2
・0.6~0.8 mm ceramic beads/2 ml Tube
推奨サンプル:土壌、堆積物
*2 NucleoSpin Soil(製品コード 740780.10/.50/.250)に含まれるものと同じ

MN Bead Tubes Type B(製品コード 740812.50)*3
・40~400 μm glass beads/2 ml Tube
推奨サンプル:グラム陽性菌、グラム陰性菌
*3 NucleoSpin Microbial DNA(製品コード 740235.10/.50)に含まれるものと同じ

MN Bead Tubes Type C(製品コード 740813.50)*4
・1~3 mm corundum/2 ml Tube
推奨サンプル:酵母、糸状菌
*4 NucleoSpin DNA Yeast(製品コード 740236.10/.50)に含まれるものと同じ

保存

室温

操作手順

全DNA抽出操作手順

用途

  • 微生物培養サンプルからの全DNA精製
  • 精製DNAはPCR、qPCR、サザンブロッティング、酵素反応などに利用可能

本製品以外に必要な試薬、機器(主なもの)

試薬
  96~100%エタノール

器具
・1.5 mlマイクロ遠心チューブ
・ピペットチップ(滅菌済)
・ピペット
・微量高速遠心機
・推奨細胞破砕装置:
  Vortex-Genie 2 (サイエンティフィックインダストリーズ社)+MN Bead Tube Holder(製品コード 740469)
  撹拌式細胞破砕装置(Retsch社NM200など)

MN Bead Tube Holder
MN Bead Tube Holder(製品コード 740469)
この製品の使用方法はこちらをご覧ください。

使用可能な細胞破砕装置(例)

・Schwingmühle MM200, MM300, MM400 (Veder Scientific社)
・FastPrep System (MP-Biomedicals社)
・Precellys (Bertin Technologies社)
・MagNa Lyser (Roche社)
・TissueLyser II and Tissue Lyser LT (QIAGEN社)
・Bullet Blender (Next Advance社)
・Mini-Beadbeater (Biospec Products社)
・Speed Mill (Analytik Jena社)
・Vortex Adapter for Vortex-Genie 2 X (MoBio社)

様々な微生物からの抽出例

微生物サンプルからのDNA抽出

図1.微生物サンプルからのDNA抽出
NucleoSpin Microbial DNA KitとMN Bead Tubes Type B(キットに含まれる)、またはMN Bead Tubes Type C(別売)を用いて様々な微生物サンプルからゲノムDNAを抽出した。
抽出DNA各100 ngをアガロースゲル電気泳動で調べた結果、全てのサンプルでRNAの混入やDNAの分解のない高分子のゲノムDNAが確認された。

1.Escherichia coli, MN Bead Tubes Type B
2.Vibrio fischerii, MN Bead Tubes Type B
3.Bacillus subtilis, MN Bead Tubes Type B
4.Corynebacterium glutamicum, MN Bead Tubes Type B
5.Saccharomyces cerevisiae, MN Bead Tubes Type C

NucleoSpin Microbial DNAで使用実績のある微生物
Microorganisms Tested by
Acinetobacter Customer
Aspergillus spec. MN
Bacillus subtilis Customer
Clostridium ljungdahlii Customer
Corynebacterium glutamicum MN
Escherichia coli MN
Eurotium spec. Customer
Klebsiella pneumoniae Customer
Microbacterium spec. Customer
Pichia pastoris Customer
Pseudomonas aeruginosa Customer
Rhizopus spec. MN
Saccharomyces cerevisiae MN
Staphylococcus pneumoniae Customer
Streptococcus pneumonieae Customer
Trametec spec. Customer
Vibrio fischerii MN

MN:マッハライ・ナーゲル社でテストした菌株種
Customer:ユーザー様よりご報告のあった菌株種

NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。

関連製品・受託

NucleoSpin® DNA Stool

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