PrimeScript™ FAST RT reagent Kit with gDNA Eraser

本製品は、ゲノムDNA除去反応をプラスしたリアルタイムRT-PCR専⽤の逆転写キットです。鋳型RNAに残存するゲノムDNAを強⼒なDNA分解活性を有するgDNA Eraserにより42℃ 2分の処理で除去した後、DNA分解活性を完全に抑制する成分を含む逆転写⽤反応試薬を添加し、10分間逆転写反応を⾏います。ゲノム除去試薬と逆転写用反応試薬はあらかじめプレミックス化してあるため、RNAサンプルに順次試薬を加える簡便な操作でゲノム除去からcDNA合成までの反応をロスなく進めることができます。
本製品を用いて得られたcDNAは、インターカレーター法、プローブ検出法のリアルタイムPCRアッセイのどちらにも利用できます。目的に応じてTB Green Premix Ex Taq II Fast qPCR（製品コード RR830S/A/B）、TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR820S/A/B）、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR420S/A/B）、Probe qPCR Mix（製品コード RR391A/B）、Probe qPCR Mix, with UNG（製品コード RR392A/B）などの定量PCR試薬と組み合わせてリアルタイムRT-PCRを⾏います。

RR092S（20 μl反応系、40回）

1.	8X gDNA Eraser Premix＊1	80 μl
2.	5X RT Premix＊2	160 μl
3.	RNase Free H2O	1 ml
4.	EASY Dilution II (for Real Time PCR)＊3	1 ml

RR092A（20 μl反応系、100回）

1.	8X gDNA Eraser Premix＊1	200 μl
2.	5X RT Premix＊2	400 μl
3.	RNase Free H2O	1 ml×2本
4.	EASY Dilution II (for Real Time PCR)＊3	1 ml

*1	8X gDNA Eraser PremixのBuffer成分がその後の逆転写反応に必要なため、ゲノムDNA除去反応は必ず⾏ってください。RNase inhibitorを含む。
*2	dNTP mixture, Oligo dT Primer, Random 6 mersを含む。
*3	total RNAやcDNAを段階希釈するための希釈溶液として使⽤する。⽔やTEで希釈すると正確な希釈ができない場合があるが、EASY Dilution II (for Real Time PCR)を⽤いると低濃度まで正確な希釈ができ、幅広いレンジで検量線が作成できる。なお、このバッファーが逆転写やPCRの反応性に影響をおよぼすことはない。希釈した鋳型溶液はそのまま逆転写反応やPCR反応の鋳型として使⽤できる。 単品でも購⼊できます。EASY Dilution II (for Real Time PCR)（製品コード 9451）

－20℃

• ゲノムDNAの除去は2分、逆転写反応は10分で完了
• プレミックス化された試薬を順次添加する簡便な操作
• 逆転写プライマーとしてRandom 6 mersとOligo dT PrimerのMixを採用、RNA全領域を均⼀に逆転写可能
• 鋳型を低濃度まで正確に希釈できるEASY Dilution II (for Real Time PCR) を添付、幅広いレンジでリアルタイムRT-PCRの検量線作成が可能

本製品を⽤いて調製したcDNA溶液を鋳型としてTB Greenアッセイを⾏う場合は、

• TB Green Premix Ex Taq II Fast qPCR（製品コード RR830S/A/B）
• TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR820S/A/B）
• TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR420S/A/B）

などのTB Green Premixシリーズの使用をお勧めします。本製品と組み合わせて使用することにより、信頼性の高い結果を得ることができます。
※TB Green Fast qPCR Mix（製品コード RR430A/B）との組み合わせは反応不良となる場合がありますのでお勧めしません。