- 1 mlと5 mlの便利なプレパックタイプのFPLC精製カートリッジ
- 生理活性のあるタンパク質を高効率で回収
- 高い純度、精製量を実現
製品説明
HisTALON Superflow Cartridgeは、TALON Superflow Resinが充填されたプレパックカートリッジで、5～20 cm/minの流速で使用することができる。TALON Superflow Resinは丈夫な多孔性アガロース誘導体であるSuperflow6にTALONの機能を付与したレジンである。このカラムにより、バクテリア、哺乳類、バキュロウイルス感染細胞などの可溶性タンパク質抽出物からHisタグ融合タンパク質を効果的に精製できる。
本カートリッジに充填されている耐圧能の高いTALON Superflow Resinは、AKTAやFPLCなどの中圧タイプのタンパク質精製自動化クロマト装置に対応しており、最大1～40 ml/minまでの線流速で使用することができる*。 また、HisTALON Superflow Cartridgeは、Luer Lock Syringe FittingとM6 FPLC Fittingの接続に対応しているため、シリンジを用いたマニュアル精製も行うことができる。1 mlカートリッジで最大20 mg、5 mlカートリッジで最大100 mgのHisタグ融合タンパク質を吸着させることができる。
* 推奨の線流速は、1 mlと5 mlサイズで異なる。
HisTALON Superflow Cartridge Purification Kitには、HisTALON Superflow Cartridges（1 ml×5カートリッジ）とHisTALON Buffer Setが含まれる。本キットを使用することで、サンプル調製から精製までを1時間以内で行うことができる。
HisTALON Buffer Setには、20回（1 mlのカラムを用いた場合）のHisタグ融合タンパク質抽出と精製を行うのに十分な量のバッファーがセットになっている。
本カートリッジに充填されている耐圧能の高いTALON Superflow Resinは、AKTAやFPLCなどの中圧タイプのタンパク質精製自動化クロマト装置に対応しており、最大1～40 ml/minまでの線流速で使用することができる*。 また、HisTALON Superflow Cartridgeは、Luer Lock Syringe FittingとM6 FPLC Fittingの接続に対応しているため、シリンジを用いたマニュアル精製も行うことができる。1 mlカートリッジで最大20 mg、5 mlカートリッジで最大100 mgのHisタグ融合タンパク質を吸着させることができる。
* 推奨の線流速は、1 mlと5 mlサイズで異なる。
HisTALON Superflow Cartridge Purification Kitには、HisTALON Superflow Cartridges（1 ml×5カートリッジ）とHisTALON Buffer Setが含まれる。本キットを使用することで、サンプル調製から精製までを1時間以内で行うことができる。
HisTALON Buffer Setには、20回（1 mlのカラムを用いた場合）のHisタグ融合タンパク質抽出と精製を行うのに十分な量のバッファーがセットになっている。
高い再現性
HisTALON Superflow Cartridgeの再現性について調べるため、Hisタグ融合AcGFP1の精製を3回連続して行った時の各回のクロマトグラフィーデータを比較した（図1）。この結果から、HisTALON Superflow Cartridgeは連続使用した時でも高度な再現性を示すことが分かる。また、各回のタンパク質含有量と蛍光シグナル強度の差異は5%以下であり（data not shown）、タンパク質抽出と精製を含んだ全ての工程は1時間以内に完了することができた。
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図1. HisTALON Superflow Cartridgeによる迅速で再現性の高いHisタグタンパク質の精製 HisTALON Superflow Cartridgeを用いて、Hisタグ融合AcGFP1を発現する大腸菌ペレット0.4 gから、ユーザーマニュアルに従いタンパク質抽出とクロマトグラフィーを3回連続して行った。精製にはFPLC（GE Healthcare）を使用し、精製は推奨されるローディングバッファーと流速により行った。洗浄と溶出が完了した後、Bradfordアッセイと相対蛍光強度により、すべての画分のタンパク質含有量を測定した。 |
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図2. HisTALON Superflow Cartridgeを用いた効率的な哺乳類サンプルの精製 HEK 293細胞ペレット200 mgからTALON xTractor Bufferを用いてHisタグ融合AcGFP1を含む哺乳類タンパク質を抽出し、HisTALON Superflow Cartridgeを用いて精製した。精製したFPLC（GE Healthcare）画分を4～15% SDS-PAGEで分析し銀染色により可視化した。HEK 293細胞から抽出した10 mgの哺乳類タンパク質から、25 μgのHisタグ融合AcGFP1を精製することができた。 |
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レーンM：Bio-Rad Precision Plus Protein All Blue Standards レーン1：HEK 293抽出物画分（25 μgのAcGFP1を含む） レーン2：非吸着画分 レーン3：溶出画分 |
図3. HisTALON Superflow Cartridge（1 mlおよび5 mlサイズ）
内容
HisTALON Superflow Cartridge Purification Kit
（製品コード 635649）
・HisTALON Superflow Cartridges（製品コード 635650）
・HisTALON Buffer Set（製品コード 635651）
HisTALON Superflow Cartridge Purification Kit
（製品コード 635681）
・HisTALON Superflow Cartridges（製品コード 635682）
・HisTALON Buffer Set（製品コード 635651）
HisTALON Buffer Set
（製品コード 635651）
・HisTALON Equilibration Buffer 250 ml×2
・HisTALON Elution Buffer 200 ml
・HisTALON xTractor Buffer 100 ml
（製品コード 635649）
・HisTALON Superflow Cartridges（製品コード 635650）
・HisTALON Buffer Set（製品コード 635651）
HisTALON Superflow Cartridge Purification Kit
（製品コード 635681）
・HisTALON Superflow Cartridges（製品コード 635682）
・HisTALON Buffer Set（製品コード 635651）
HisTALON Buffer Set
（製品コード 635651）
・HisTALON Equilibration Buffer 250 ml×2
・HisTALON Elution Buffer 200 ml
・HisTALON xTractor Buffer 100 ml
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