コンポーネントのプレミックス化で操作性がアップ
- 非常に効率よくRT-PCR増幅産物が得られる。
- 簡便な操作で反応を行うことができる。
- 非特異的な増幅を最小限に抑えるため、50℃で効率よく逆転写反応が進むように反応系を工夫している。
- 反応液調製時などサイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を抑制する。
製品説明
本製品は、RT-PCRを一本のチューブ内で連続的に行う1ステップRT-PCR用のキットである。反応途中で試薬を添加する必要がないため、コンタミネーションの心配がない。逆転写反応には、M-MLV由来のRTaseをベースにしてタカラバイオが独自に開発した新規逆転写酵素PrimeScript RTaseを採用している。本酵素は高次構造をとりうる鋳型RNAに対しても優れた伸長性を示す。また、PCRには増幅効率に優れたHot Start PCR用酵素TaKaRa Ex Taq HSを用いている。
Ver.2では、PrimeScript RTaseとTaKaRa Ex Taq HSおよびRNase Inhibitorを1 step RT-PCR用に高度に至適化し安定化剤とともにプレミックス化したPrimeScript 1 step Enzyme Mixと、反応バッファーとdNTP MixtureおよびOne Step Enhancer Solutionをプレミックス化した2×1 step Bufferを使用することで反応液の調製を大幅に簡便化している。
Ver.2では、PrimeScript RTaseとTaKaRa Ex Taq HSおよびRNase Inhibitorを1 step RT-PCR用に高度に至適化し安定化剤とともにプレミックス化したPrimeScript 1 step Enzyme Mixと、反応バッファーとdNTP MixtureおよびOne Step Enhancer Solutionをプレミックス化した2×1 step Bufferを使用することで反応液の調製を大幅に簡便化している。
内容
（50回用）
*1 Positive Control RNA用上流センスプライマー
*2 Positive Control RNA用下流アンチセンスプライマー
| 1. | PrimeScript 1 step Enzyme Mix | 100 μl |
| 2. | 2×1 step Buffer | 625 μl×2 |
| 3. | Control F-1 Primer*1 （20 μM） | 20 μl |
| 4. | Control R-1 Primer*2 （20 μM） | 20 μl |
| 5. | Positive Control RNA （2×105 copies/μl） | 20 μl |
| 6. | RNase Free dH2O | 625 μl×2 |
*1 Positive Control RNA用上流センスプライマー
*2 Positive Control RNA用下流アンチセンスプライマー
保存
－20℃
特長
| RNAテンプレート | 全般 |
| 増幅サイズ | 8 kbの増幅を確認 |
| PrimeScript 1 step Emzyme Mix | 逆転写酵素（PrimeScript RTase）、 DNA Polymerase（TaKaRa Ex Taq HS）、 RNase Inhibitorを含む |
| 2×1 step Buffer | 反応バッファー、dNTP Mixture（最終濃度400 μM）、One Step Enhancer Solutionを含む |
| 1st strand cDNA合成用プライマー | 特異的下流プライマー (PCR時のアンチセンスプライマー） 注：Oligo dTプライマーやランダムプライマーは使用不可 |
| 操作 | 1本のチューブ内で連続的にRT-PCRを行う |
キット以外に必要な試薬、機器（主なもの）
- 遺伝子増幅システム
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient／Standerd（製品コード TP600／TP650）
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Touch（製品コード TP350）など - アガロースゲル
Agarose L03「TAKARA」（製品コード 5003）
PrimeGel Agarose PCR-Sieve（製品コード 5810A）など - 電気泳動装置
Mupid-2plus（製品コード M-2P）
Mupid-exU（製品コード EXU-1）など - マイクロ遠心機
- マイクロピペットおよびチップ（オートクレーブ処理したもの）
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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