製品説明
本製品は、RT-PCRを一本のチューブ内で連続的に行う1ステップRT-PCR用のキットである。反応途中で試薬を添加する必要がないため、コンタミネーションの心配がない。逆転写反応には、M-MLV由来のRTaseをベースにしてタカラバイオが独自に開発した新規逆転写酵素PrimeScript RTaseを採用している。本酵素は高次構造をとりうる鋳型RNAに対しても優れた伸長性を示す。また、PCRには増幅効率に優れたHot Start PCR用酵素TaKaRa Ex Taq HSを用いている。
Ver.2では、PrimeScript RTaseとTaKaRa Ex Taq HSおよびRNase Inhibitorを1 step RT-PCR用に高度に至適化し安定化剤とともにプレミックス化したPrimeScript 1 step Enzyme Mixと、反応バッファーとdNTP MixtureおよびOne Step Enhancer Solutionをプレミックス化した2×1 step Bufferを使用することで反応液の調製を大幅に簡便化している。
内容
(50回用)
1. |
PrimeScript 1 step Enzyme Mix |
100 μl |
2. |
2×1 step Buffer |
625 μl×2 |
3. |
Control F-1 Primer*1 (20 μM) |
20 μl |
4. |
Control R-1 Primer*2 (20 μM) |
20 μl |
5. |
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) |
20 μl |
6. |
RNase Free dH2O |
625 μl×2 |
*1 Positive Control RNA用上流センスプライマー
*2 Positive Control RNA用下流アンチセンスプライマー
保存
-20℃
特長
RNAテンプレート |
全般 |
増幅サイズ |
8 kbの増幅を確認 |
PrimeScript 1 step Emzyme Mix |
逆転写酵素(PrimeScript RTase)、 DNA Polymerase(TaKaRa Ex Taq HS)、 RNase Inhibitorを含む |
2×1 step Buffer |
反応バッファー、dNTP Mixture(最終濃度400 μM)、One Step Enhancer Solutionを含む |
1st strand cDNA合成用プライマー |
特異的下流プライマー (PCR時のアンチセンスプライマー) 注:Oligo dTプライマーやランダムプライマーは使用不可 |
操作 |
1本のチューブ内で連続的にRT-PCRを行う |
キット以外に必要な試薬、機器(主なもの)
- 遺伝子増幅システム
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient/Standerd(製品コード TP600/TP650)
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Touch(製品コード TP350)など
- アガロースゲル
Agarose L03「TAKARA」(製品コード 5003)
PrimeGel Agarose PCR-Sieve(製品コード 5810A)など
- 電気泳動装置
Mupid-2plus(製品コード M-2P)
Mupid-exU(製品コード EXU-1)など
- マイクロ遠心機
- マイクロピペットおよびチップ(オートクレーブ処理したもの)