ウェスタンブロッティングの迅速検出に
- 迅速ウェスタンブロッティング検出（転写後1時間で検出可能）
- 一次抗体反応の際に本試薬を使用するだけ（HRP標識二次抗体は不要）
- 迅速検出プロトコールの他、検出感度を上げる各種オプションプロトコールもご紹介
製品説明
Western BLoT Rapid Detect v2.0は、標識二次抗体に独自のHRP標識IgG Detectorを利用して一次抗体を検出するウェスタンブロッティング専用の検出試薬キットである。
本製品の主要コンポーネントのIgG Detectorは、抗体のFc領域に結合するタンパク質約100分子を表面に提示したタンパク質粒子で、約50分子のHRPによって標識されている。このように特別にデザインされたIgG Detectorにより、本試薬では迅速検出、高感度検出、複数抗体を用いた同時検出など、一般的なウェスタンブロット法では実現できなかった様々なアプリケーションが可能である。
また、Western BLoT Rapid Detect v2.0では、希釈バッファーにブロッキング成分を加えることにより、従来品よりさらに簡便な使用が可能となり、さらなる高感度化も実現している。
本製品はHRP用化学発光基質Western BLoT HRP Substrateシリーズとの組み合わせで検出できることを確認している。ウェスタンブロットにおいて、本製品とWestern BLoT HRP Substrateシリーズを組み合わせて使用することで、さらに高感度検出や迅速検出が可能となる。
本製品の主要コンポーネントのIgG Detectorは、抗体のFc領域に結合するタンパク質約100分子を表面に提示したタンパク質粒子で、約50分子のHRPによって標識されている。このように特別にデザインされたIgG Detectorにより、本試薬では迅速検出、高感度検出、複数抗体を用いた同時検出など、一般的なウェスタンブロット法では実現できなかった様々なアプリケーションが可能である。
また、Western BLoT Rapid Detect v2.0では、希釈バッファーにブロッキング成分を加えることにより、従来品よりさらに簡便な使用が可能となり、さらなる高感度化も実現している。
本製品はHRP用化学発光基質Western BLoT HRP Substrateシリーズとの組み合わせで検出できることを確認している。ウェスタンブロットにおいて、本製品とWestern BLoT HRP Substrateシリーズを組み合わせて使用することで、さらに高感度検出や迅速検出が可能となる。
内容
| 1．IgG Detector Solution v2 (HRP labeled) | 250 μl |
| 2．10×Dilution Buffer v2 | 60 ml |
| 3．Enhancer for Mouse IgG v2 | 250 μl |
| 4．Marker Detection Reagent v2 | 50 μl |
保存
－20℃
| 注意 | IgG Detector Solution v2 (HRP labeled)は、使用直前まで－20℃で保存し、使用後は直ちに－20℃に保存してください。本試薬は、4℃や室温で保存すると劣化する可能性があります。 |
操作フロー（Rapidプロトコール）
一次抗体とIgG Detector Solutionをあらかじめ混合して1ステップで迅速検出を行う（所要時間：転写後1時間）。
標識二次抗体は使用せず、複数の一次抗体の同時検出も可能である（免疫動物種が異なってもよい）。
上記の他、本試薬では、以下の使用法も可能である。
標識二次抗体は使用せず、複数の一次抗体の同時検出も可能である（免疫動物種が異なってもよい）。
| ＊1 | 一次抗体にMouse IgG1を用いる場合は、IgG Detector希釈バッファーにEnhancer for Mouse IgG v2を2,000倍になるように加える。 |
| ＊2 | 一次抗体の反応液に複数の一次抗体を加えると、複数抗体を同時に検出することが可能である。 |
| ＊3 | IgG結合配列をもつタンパク質分子量マーカーを検出する場合は、一次抗体反応液にMarker Detection Reagent v2を10,000倍になるように加える。 |
上記の他、本試薬では、以下の使用法も可能である。
| プロトコール | 内容 |
|---|---|
| 2ステップ高感度プロトコール 操作フローはこちら |
|
| 二次抗体増感プロトコール 操作フローはこちら |
|
|
リプローブ増感プロトコール 操作フローはこちら |
|
キット以外に必要なもの
- ブロッキング溶液
※ スキムミルクよりタンパク質性のブロッキング溶液（1% BSA in TBS-T 等）の方が、より高いシグナルが得られます。スキムミルクをご使用になる場合は、試薬グレードのものをご利用ください。 - TBS-T：Tris Buffered Saline with Tween20 (TBS-T) Tablets, pH7.6（製品コード T9142）（TBS-T 組成：150 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 0.1% Tween20, pH7.6）
- その他、ウェスタンブロッティングに必要な全ての試薬、機器等をあらかじめ準備してください。
検出は、化学発光による検出を推奨します。
関連資料
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抗体検索サイト関連製品・受託
Western BLoT HRP Substrateシリーズ
Western BLoT Immuno Booster
Western BLoT Immuno Booster PF
Western BLoT Blocking Buffer (Protein Free)
Western BLoT Blocking Buffer(Fish Gelatin)
Western BLoT Stripping Buffer
Tris-Glycine Powder
TBS（Tris-Buffered Saline）タブレット 大容量品
PBS（Phosphate Buffered Salts）タブレット 大容量品
TaKaRa BCA Protein Assay Kit
TaKaRa Bradford Protein Assay Kit
Protein Ladder Marker （プレミックスタイプ）
ブロッティング用メンブレン
ブロッティング用濾紙
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ゼラチンベースのブロッキング剤
- 注意事項
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