主要な血清型を遺伝子タイピング（O157、O26、O111、O121、O103、O145）
- 主要な血清型を遺伝子タイピング
- プレミックス試薬のため、初心者でも簡単
- FAMとROXを検出できる幅広い装置で使用可能
製品説明
腸管出血性大腸菌の検出においては、まずベロ毒素遺伝子の保有状況によるスクリーニングを行い、ベロ毒素遺伝子陽性であれば、O抗原型の遺伝子タイピングをした上で、分離培養を行う方法が効率的であるとされています。
本シリーズは、腸管出血性大腸菌のO抗原型の遺伝子タイピングを、リアルタイムPCRにより行うためのキットで、O抗原型の主要な血清型のO157／O26、O111／O121、O103／O145をそれぞれ検出することができます。各キットには、O157とO26、O111とO121、O103とO145の組み合わせで、それぞれのO抗原合成遺伝子領域の遺伝子を検出するためのFAM標識プローブとROX標識プローブが含まれています。（下表）
二波長を同時にモニタリングすることで、一本のチューブで2種類のO抗原型の検出が可能です。リアルタイムPCRによるタイピングであり、電気泳動が不要で、迅速に結果が得られます。
【ご注意】
詳しくはこちらをご覧ください。
本シリーズは、腸管出血性大腸菌のO抗原型の遺伝子タイピングを、リアルタイムPCRにより行うためのキットで、O抗原型の主要な血清型のO157／O26、O111／O121、O103／O145をそれぞれ検出することができます。各キットには、O157とO26、O111とO121、O103とO145の組み合わせで、それぞれのO抗原合成遺伝子領域の遺伝子を検出するためのFAM標識プローブとROX標識プローブが含まれています。（下表）
二波長を同時にモニタリングすることで、一本のチューブで2種類のO抗原型の検出が可能です。リアルタイムPCRによるタイピングであり、電気泳動が不要で、迅速に結果が得られます。
【ご注意】
- 測定結果の判定方法に「＋／－判定の基準値」を追加しました。詳しくは取扱説明書をご確認ください。
- CycleavePCR EHEC (O157/O26) Typing Kit（製品コード CY237）
- CycleavePCR EHEC (O111/O121) Typing Kit（製品コード CY238）
- CycleavePCR EHEC (O103/O145) Typing Kit（製品コード CY239） 上記3製品を用いる検出法は、厚生労働省医薬食品局食品安全部監視安全課長通知（平成26年11月20日）
「腸管出血性大腸菌O26、O103、O111、O121、O145及びO157の検査法について」（食安監発1120第1号）に収載されました。
詳しくはこちらをご覧ください。
| 製品 | ターゲット遺伝子 | 蛍光検出波長 |
| CycleavePCR EHEC (O157/O26) Typing Kit | O157 | FAM |
| O26 | ROX | |
| CycleavePCR EHEC (O111/O121) Typing Kit | O111 | FAM |
| O121 | ROX | |
| CycleavePCR EHEC (O103/O145) Typing Kit | O103 | FAM |
| O145 | ROX |
内容
例）CycleavePCR EHEC（O157/O26）Typing Kit（製品コード CY237）
＊ 蛍光標識プローブを含んでいますので、遮光に留意してください。
コンポーネント1～3は、製品に添付している小箱を利用し、4～6のコンポーネントとは別に保管してください。
【コンポーネントの説明】
2×Cycleave Reaction Mixture：
PCR反応試薬。反応に必要な酵素、Buffer、dNTP Mixtureを含む。
O157/O26 Primer/Probe Mix：
O157およびO26のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子をそれぞれ検出するためのプライマー・プローブ溶液。O157検出用のプローブはFAM、O26検出用のプローブはROXで標識されている。
dH2O：滅菌水
O157 Positive Control：O157検出用陽性コントロール
O26 Positive Control：O26検出用陽性コントロール
EASY Dilution (for Real Time PCR)：
Positive Controlを希釈する際に、希釈溶液として使用
| ●1． | 2×Cycleave Reaction Mixture | 2×conc. | 250 μl |
| ●2． | O157/O26 Primer/Probe Mix＊ | 5× conc. | 100 μl |
| ○3． | dH2O | 1 ml | |
| ●4． | O157 Positive Control | 40 μl（8回分） | |
| ●5． | O26 Positive Control | 40 μl（8回分） | |
| ○6． | EASY Dilution (for Real Time PCR) | 1 ml | |
コンポーネント1～3は、製品に添付している小箱を利用し、4～6のコンポーネントとは別に保管してください。
【コンポーネントの説明】
2×Cycleave Reaction Mixture：
PCR反応試薬。反応に必要な酵素、Buffer、dNTP Mixtureを含む。
O157/O26 Primer/Probe Mix：
O157およびO26のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子をそれぞれ検出するためのプライマー・プローブ溶液。O157検出用のプローブはFAM、O26検出用のプローブはROXで標識されている。
dH2O：滅菌水
O157 Positive Control：O157検出用陽性コントロール
O26 Positive Control：O26検出用陽性コントロール
EASY Dilution (for Real Time PCR)：
Positive Controlを希釈する際に、希釈溶液として使用
保存
－20℃
CycleavePCR™ EHEC (O157/O26) Typing Kit（製品コード CY237）での検出例
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本製品以外に必要な機器、器具、試薬（主なもの）
- 【機器】
- リアルタイムPCR装置
- Thermal Cycler Dice Real Time System IV with PC（製品コード TP1010）
- Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC（製品コード TP970）
- Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
- Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
- Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）など
（詳しくは弊社までお問い合わせください。）
- ヒートブロック
- 【その他】
-
NucleoSpin® Tissue（製品コード 740952.10/.50/.250）
200 μl、20 μl、10 μl 各マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
卓上遠心機
微量高速遠心機
補足資料
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual～定性解析（＋／－判定）用～”を用意している。
キットの説明書とあわせて使用する。
Quick Manual ～定性解析（＋／－判定）用～（PDF、946 K）
また、「CycleavePCR EHEC（O抗原型）Typing Kit」を用いて、6種のO抗原型を同時に測定する場合に便利なマニュアルと、結果出力と解析方法を示したマニュアルを用意しています。解析の一例としてご参考ください。
6種のO抗原型を同時に測定する場合の設定方法（PDF、337 K）
O抗原型タイピングキットの結果出力と解析方法（PDF、337 K）
キットの説明書とあわせて使用する。
Quick Manual ～定性解析（＋／－判定）用～（PDF、946 K）
また、「CycleavePCR EHEC（O抗原型）Typing Kit」を用いて、6種のO抗原型を同時に測定する場合に便利なマニュアルと、結果出力と解析方法を示したマニュアルを用意しています。解析の一例としてご参考ください。
6種のO抗原型を同時に測定する場合の設定方法（PDF、337 K）
O抗原型タイピングキットの結果出力と解析方法（PDF、337 K）
- 注意事項
- 本製品は食品分析および環境分析用試薬です。ヒト、動物への医療、臨床診断には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。検査結果判定により発生する問題に関してタカラバイオ株式会社は一切の責任を負いません。
- タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
- タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。 - ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。
