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○ 1. | 2×Multiplex PCR Buffer(Mg2+, dNTP plus) | 625 μl×2 |
○ 2. | Multiplex PCR Enzyme Mix | 12.5 μl |
● 3. | Primer Mix (EHEC O antigens) 5×conc. | 500 μl |
○ 4. | dH2O | 1 ml |
● 5. | Control Template 1 | 100 μl |
● 6. | Control Template 2 | 100 μl |
ターゲット遺伝子 | 増幅サイズ |
O26のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子 | 241 bp |
O103のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子 | 716 bp |
O111のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子 | 451 bp |
O121のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子 | 193 bp |
O145のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子 | 132 bp |
O157のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子 | 292 bp |
O165のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子 | 1,042 bp |
ベロ毒素1型遺伝子(stx1) | 348 bp |
ベロ毒素2型遺伝子(stx2) | 584 bp |
eae遺伝子 | 881 bp |
レーン | O血清群 | O血清群 PCRの産物サイズ | stx1 (348 bp) | stx2 (584 bp) | eae (881 bp) |
---|---|---|---|---|---|
1 | O165 | 1,042 bp | + | + | + |
2 | O103 | 716 bp | + | + | + |
3 | O111 | 451 bp | + | + | + |
4 | O157 | 292 bp | + | + | + |
5 | O26 | 241 bp | + | - | + |
6 | O121 | 193 bp | - | + | + |
7 | O145 | 132 bp | + | - | + |
ベロ毒素遺伝子 (VT1、VT2) のタイピング
ベロ毒素遺伝子検出キット(厚労省通知収載)
ベロ毒素遺伝子検出キット(厚労省通知収載)
7血清型を遺伝子タイピング(O157、O26、O111、O121、O103、O145)