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まず、48 μgのビオチン化ウサギIgG/200 μl Binding Bufferを平衡化済みのCapturem Streptavidinカラムに加えて遠心した。その結果、32.0±1.4 μgのビオチン化ウサギIgGがメンブレンに結合した(Panel B)。次に、カラムを一度洗浄後、目的抗体(抗ウサギ IgGヤギ抗体~100 μg)を含む20%マウス血清添加ハイブリドーマ培地をBinding Bufferで希釈し、カラムに加えて遠心した。続いてBinding BufferとPBSでカラムを一度ずつ洗浄した。最後に、1.0 M glycineで目的抗体を3回溶出した。その結果、42±5 μgの収量で、高純度な目的抗体が回収できた(Panel C)。
ビオチン化オリゴヌクレオチド、ビオチン化BSAについて、それぞれ8つのreplicateを作成し、Capturem Streptavidin 96-Well Plateに遠心法で結合させた。カラムに加える前後のサンプルをO.D測定によって定量し、カラムへの結合量を求めた(パネルA:ビオチン化オリゴヌクレオチド、パネルB:ビオチン化BSA)。Capturem Streptavidin 96-Well Plateの標準プロトコールは、15分以内で実施することができる。
Simple, rapid streptavidin-based enrichment using Capturem technology わずか15分で完了する「Capturemテクノロジー」を用いた抗体標識
Capturem™シリーズ
Capturem™ His-Tagged Purification Capturem™ Protein A
Capturemに関するQ&A
簡便、迅速な免疫沈降、共免疫沈降実験に最適化したカラム
タンパク質操作を室温下で簡単・迅速に
短時間の簡便な操作で高純度ヒスタグ融合タンパク質の精製が可能
磁性ストレプトアビジンビーズ
簡便・迅速な操作で抗体を高濃度・高純度に精製が可能