拭き取り検体からウイルスを濃縮して検出
- 前処理は専用濃縮液による遠心濃縮のみ（熱処理不要）
- 反応液調製は2種類のコンポーネントを混合するだけ
- 1チューブでGI遺伝子、GII遺伝子、インターナルコントロールを検出
- PCR増幅産物のキャリーオーバーによる偽陽性を防止
製品説明
ノロウイルス（NoV）は急性胃腸炎の主要な原因ウイルスであり、組織培養法などを用いた分離・検出が困難なため、RT-PCR法やリアルタイムRT-PCR法などによって、ウイルスの検査診断が行われている。
本製品は、拭き取り検体からノロウイルスを濃縮し、リアルタイムRT-PCR法によりGIおよびGII遺伝子を検出するためのキットである。
【特長】
GIおよびGII遺伝子の検出には、厚生労働省通知法＊に収載されたものと同様な配列のプライマー、プローブを使用しているが、GII検出系に関しては、一部のプライマーを増幅領域の内側にずらしたもの（GII改良プライマー）を採用している。この変更によりGII低コピー検体の検出感度が向上する。
GII改良プライマーによる検出性能の効果についてはこちら
本製品は、拭き取り検体からノロウイルスを濃縮し、リアルタイムRT-PCR法によりGIおよびGII遺伝子を検出するためのキットである。
【特長】
- 検査フロー
- 迅速便利なオールインワンキット
所要時間は最短1時間20分！ - 前処理は専用濃縮液による遠心濃縮のみ
拭き取り検体に専用濃縮液を添加し、室温で遠心分離を行うだけで迅速、簡便にノロウイルスを濃縮可能。
鋳型の調製は遠心後のペレットをH2Oで溶解するだけで完了する（熱処理不要）。 - 反応液調製は2種類のコンポーネントを混合するだけ
PCR反応液の調製は、RT-PCR Reaction Mix 2とNV Primer/Probe Mix 8を混ぜるだけで完了（室温調製可能）。ポジティブコントロールも付属している。 - 1チューブでGI遺伝子、GII遺伝子、インターナルコントロールを検出
プローブによるマルチプレックス検出を行い、GIとGIIを明確に区別可能。インターナルコントロール検出により偽陰性を防止。
判定イメージGI（Cy5）、GII（ROX）の増幅曲線を確認。
ともに増幅が無い場合はIC（FAM）の増幅結果からPCR阻害の有無を確認。
- PCR 増幅産物のキャリーオーバーによる偽陽性を防止
UNG（ウラシル-N-グリコシラーゼ）の働きにより、キャリーオーバーしたPCR産物を分解して偽陽性を防止。
GIおよびGII遺伝子の検出には、厚生労働省通知法＊に収載されたものと同様な配列のプライマー、プローブを使用しているが、GII検出系に関しては、一部のプライマーを増幅領域の内側にずらしたもの（GII改良プライマー）を採用している。この変更によりGII低コピー検体の検出感度が向上する。
GII改良プライマーによる検出性能の効果についてはこちら
＊「ノロウイルスの検出法について」厚生労働省医薬食品局食品安全部監視安全課
（平成15年11月5日付け食安監発第1105001号別添 最終改正：平成25年10月22日付け食安監発1022第1号）
（平成15年11月5日付け食安監発第1105001号別添 最終改正：平成25年10月22日付け食安監発1022第1号）
| 検出対象遺伝子 | プローブ標識 |
| GI遺伝子 | Cy5（レポーター）／ダーククエンチャー |
| GII遺伝子 | ROX（レポーター）／ダーククエンチャー |
| インターナルコントロール | FAM（レポーター）／ダーククエンチャー |
内容
| 1. RT-PCR Reaction Mix 2＊1 | 700 μl |
| 2. NV Primer/Probe Mix 8＊2 | 300 μl |
| 3. NV Positive Control DNA 5 | 100 μl |
| 4. H2O | 1 ml |
| 5. NV Concentration Reagent＊3 | 10 ml×2 |
*1 酵素、基質等を含む。
*2 蛍光標識プローブを含んでいるため、遮光に留意すること。
*3 NV Concentration Reagentは神戸常盤大学・保健科学部の研究成果に基づく。
*2 蛍光標識プローブを含んでいるため、遮光に留意すること。
*3 NV Concentration Reagentは神戸常盤大学・保健科学部の研究成果に基づく。
保存
－20℃
キット以外に必要なもの
- 【器具】
-
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付） - 【機器】
-
リアルタイムPCR装置（Cy5、ROX、FAMを検出可能なもの）
Thermal Cycler Dice Real Time System III (Cy5) with PC（製品コード TP990）
Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900／TP960：終売）
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700／TP760：終売）
注：TP900／TP960（終売）、TP700／TP760（終売）は、Cy5オプションフィルターの追加が必要です。
CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System（Bio-Rad社）
Filter Unit(Cy5) for Thermal Cycler Dice Real Time System（製品コード TP803：お問合せください）
Filter Unit(Cy5) for LED（製品コード TP703）
LightCycler 96 System（Roche Diagnostics社）
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
補足
【Quick Manual】
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意している。
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用する。
ノロウイルス拭き取り検査のため操作マニュアル
－TaKaRaノロウイルスGI/GII検出キット（製品コード RR242A）専用－
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意している。
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用する。
ノロウイルス拭き取り検査のため操作マニュアル
－TaKaRaノロウイルスGI/GII検出キット（製品コード RR242A）専用－
＊ 牡蠣からのノロウイルス検出には、TaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit (1 Step) Ver.2（製品コード RR266A）もしくはTaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit Ver.2（製品コード RR265A/B）をご利用ください。
＊ 検便検体からのノロウイルス検出にはTaKaRaノロウイルスGI/GII検出キット（1液タイプ）Ver.2（製品コード RR204A）もしくはTaKaRaノロウイルスGI/GII検出キットVer.4（製品コード RC130A）をご利用ください。
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- 注意事項
- 本製品は食品分析および環境分析用試薬です。ヒト、動物への医療、臨床診断には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。検査結果判定により発生する問題に関してタカラバイオ株式会社は一切の責任を負いません。
- タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
- タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。 - ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。
