NucleoBond® RS

ワクチングレードのプラスミドDNA調製に
  • エンドトキシンレベル≦0.01 EU/μg DNAで、ワクチングレードのプラスミドDNA調製に最適
  • ÄKTAなどのFPLCに対応した密閉型カラム(ペリスタポンプでも使用可能)
  • カラムサイズの選択により、10 mgから最大 200 mgのプラスミドDNA調製に対応
  • レンチウイルス/AAV 産生やIVT-RNA(mRNAなど)合成の出発材料として用いる高品質プラスミドDNA調製に
NucleoBond RS

製品概要へ

製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
743502

MNA

マッハライ・ナーゲル社
NucleoBond® RS 10
取寄
5個 ¥80,000
説明書・データシート・ベクター情報
U3502A
743503

MNA

マッハライ・ナーゲル社
NucleoBond® RS 50
取寄
1個 ¥76,000
説明書・データシート・ベクター情報
U3503A
743504

MNA

マッハライ・ナーゲル社
NucleoBond® RS 100
取寄
1個 ¥148,000
説明書・データシート・ベクター情報
U3504A
743505

MNA

マッハライ・ナーゲル社
NucleoBond® RS 200
取寄
1個 ¥260,000
説明書・データシート・ベクター情報
U3505A
740397

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Liquid RNase A
取寄
2.5 ml ¥44,000
説明書・データシート・ベクター情報
U0397A
740505

MNA

マッハライ・ナーゲル社
RNase A(凍結乾燥品)
100 mg ¥19,000
説明書・データシート・ベクター情報
U0505A
740386.1000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer RES-EF
取寄
1,000 ml ¥22,000
U0386A
740386.3000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer RES-EF
取寄
3,000 ml ¥64,000
U0386B
740387.1000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer LYS-EF
取寄
1,000 ml ¥22,000
U0387A
740387.3000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer LYS-EF
取寄
3,000 ml ¥64,000
U0387B
740388.1000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer NEU-EF
取寄
1,000 ml ¥22,000
U0388A
740388.3000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer NEU-EF
取寄
3,000 ml ¥64,000
U0388B
740380.1000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer EQ-EF
取寄 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
1,000 ml ¥24,000
U0380A
740380.3000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer EQ-EF
取寄 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
3,000 ml ¥70,000
U0380B
740381.1000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer ENTO-EF
取寄 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
1,000 ml ¥24,000
U0381A
740381.3000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer ENTO-EF
取寄 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
3,000 ml ¥70,000
U0381B
740392.3000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer WASH-EF
取寄 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
3,000 ml ¥70,000
U0392B
740393.3000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer ELU-EF
取寄 労働安全衛生法 安全データシート(SDS)添付
3,000 ml ¥76,000
U0393B
740797.1

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer TE-EF
取寄
1,000 ml ¥16,000
U0797A
740798.1

MNA

マッハライ・ナーゲル社
H2O-EF
取寄
1,000 ml ¥11,000
U0798A
740382.1000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer BMC-EF
NEW 取寄 化学物質排出把握管理促進法(PRTR法) 安全データシート(SDS)添付
1,000 ml ¥25,000
U0382A
740382.3000

MNA

マッハライ・ナーゲル社
Buffer BMC-EF
NEW 取寄 化学物質排出把握管理促進法(PRTR法) 安全データシート(SDS)添付
3,000 ml ¥75,000
U0382B
カートにいれる

WEB会員ログインが必要です

製品説明

近年の細胞治療や遺伝子治療、ワクチン製造の急速な進歩に伴い、高品質なプラスミドDNAの必要性が急速に高まっています。
mRNAベースのワクチンや遺伝子治療などのアプリケーションには、出発材料として高品質なプラスミドDNAが不可欠です。免疫システムに炎症反応を引き起こすグラム陰性菌の細胞壁成分であるエンドトキシンは、プラスミド精製過程で大腸菌などより大量に放出されるため、このエンドトキシンの除去が課題の一つとなっています。
本製品は、NucleoBond RSワークフローを採用することにより、エンドトキシンレベル≦0.01 EU/μg DNAを達成しており、医療用のプラスミドDNAに求められる厳しい規制基準を満たすことができます。また、NucleoBond RSカラムは、ペリスタポンプによる流量調節やÄKTAなどのFPLCシステムと組み合わせて、培養菌体からワクチングレードの高品質なプラスミドDNAを大規模に単離、精製できるように設計されています。本製品には4種類のサイズの異なるカラムが用意されており、プラスミドDNAの必要量に応じてカラムサイズを選択することが可能です。

横にスクロールできます
 NucleoBond RS 10NucleoBond RS 50NucleoBond RS 100NucleoBond RS 200
用途ワクチングレードの plasmid DNAの単離、精製(研究用)
原理陰イオン交換クロマトグラフィー法
操作方法ペリスタポンプ、FPLC
自動化への対応非対応
サンプル量湿菌体重量 ≦8 g湿菌体重量 ≦40 g湿菌体重量 ≦80 g湿菌体重量 ≦145 g
プラスミドDNAサイズ<300 kbp
結合容量10 mg50 mg100 mg200 mg
A260/A2801.8~2.0
エンドトキシンレベル≦0.01 EU/μg DNA
表1.NucleoBond RSカラムで得られるプラスミドDNAの純度基準
測定方法基準
形状アガロースゲル電気泳動
キャピラリー電気泳動
≧90% スーパーコイル型
純度UVスペクトルA260/A280 1.8~2.0
A260/A230 1.9~2.3
エンドトキシンレベルLAL試験/rFCアッセイ≦0.01 EU/μg DNA
Host DNAqPCR≦1%
Host RNAアガロースゲル電気泳動
蛍光色素による核酸定量
200 ng DNAを泳動時に非検出
≦2%
Host ProteinBCA法≦1%

プラスミドDNAの最大収量
図1.プラスミドDNAの最大収量
4種類のサイズ別NucleoBond RSカラムを使用して大腸菌から得られた精製プラスミドDNAの最大量を示す。

精製プラスミドDNAにおけるスーパーコイルの含有率
図2.精製プラスミドDNAにおけるスーパーコイルの含有率
遺伝子治療やワクチン製造などのアプリケーションには、プラスミドDNAがスーパーコイル状であることが望ましいとされており、90%以上がスーパーコイルであることが求められる。NucleoBond RSカラムで精製したプラスミドは、90%以上がスーパーコイルとなる。

表2.NucleoBond RSカラムで精製したプラスミドの品質
横にスクロールできます
NucleoBond RS 10 NucleoBond RS 50 NucleoBond RS 100 NucleoBond RS 200
Endotoxins(EU/μg DNA) 0.009 ± 0.004 0.007 ± 0.006 0.003 ± 0.002 0.003 ± 0.003
A260/A280 1.99 ± 0.04 1.97 ± 0.02 1.97 ± 0.04 1.98 ± 0.01
Supercoiled form(ccc) in % 92.3 ± 3.0 93.8 ± 2.1 93.0 ± 3.1 95.2 ± 2.1
NucleoBond RSカラムで精製したプラスミドDNAは、エンドトキシンレベル0.01 EU/μg DNA以下、A260/A280 1.8~2.0、スーパーコイル(ccc)含有率90%以上という基準を満たしている。

内容

NucleoBond RS 10(製品コード 743502)
NucleoBond RS 10 Column  5本

NucleoBond RS 50(製品コード 743503)
NucleoBond RS 50 Column  1本

NucleoBond RS 100(製品コード 743504)
NucleoBond RS 100 Column 1本

NucleoBond RS 200(製品コード 743505)
NucleoBond RS 200 Column 1本

【注意】
NucleoBond RS Columnシリーズはカラム単体の販売となっており、プラスミドDNAの精製に必要な酵素やバッファーは含まれておりません。酵素、バッファーは別途ご購入ください。

保存

室温(15~25℃)
(RNase Aを添加したBuffer RES-EFは4℃で保存する。12ヵ月間安定)
※Buffer LYS-EFにはSDSが含まれているため、20℃以下で保存すると、沈殿が生じることがある。
沈殿が生じた場合は、30~40℃で数分間、ボトルを保温し、混合して溶解した後に使用する。

本製品以外に必要な試薬、機器、消耗品(主なもの)

試薬
  • Liquid RNase A(製品コード 740397)またはRNase A (lyophilized)(製品コード740505.30)

  • Buffer RES-EF(製品コード 740386.1000/.3000)

  • Buffer LYS-EF(製品コード 740387.1000/.3000)

  • Buffer NEU-EF(製品コード 740388.1000/.3000)

  • Buffer EQ-EF(製品コード 740380.1000/.3000)

  • Buffer ENTO-EF(製品コード 740381.1000/.3000)

  • Buffer WASH-EF(製品コード 740392.1000/.3000)

  • Buffer ELU-EF(製品コード 740393.900/.3000)

  • Buffer TE-EF(オプション)(製品コード 740797.1)

  • H2O-EF(オプション)(製品コード 740798.1)

  • 各Bufferの使用量の目安
    横にスクロールできます
    製品名 製品コード 容量 使用回数の目安
    NucleoBond RS 10 NucleoBond RS 50 NucleoBond RS 100 NucleoBond RS 200
    Buffer RES-EF 740386.1000 1,000 ml 15 3 1 -
    740386.3000 3,000 ml 46 9 4 2
    Buffer LYS-EF 740387.1000 1,000 ml 15 3 1 -
    740387.3000 3,000 ml 46 9 4 2
    Buffer NEU-EF 740388.1000 1,000 ml 15 3 1 -
    740388.3000 3,000 ml 46 9 4 2
    Buffer EQ-EF 740380.1000 1,000 ml 28 8 3 2
    740380.3000 3,000 ml 85 24 11 7
    Buffer WASH-EF 740392.1000 1,000 ml 28 6 3 1
    740392.3000 3,000 ml 85 19 9 5
    Buffer ELU-EF 740393.900 900 ml 25 7 3 2
    740393.3000 3,000 ml 85 24 11 7
    Buffer TE-EF 740797.1 1,000 ml 95 19 9 4
    H2O-EF 740798.1 1,000 ml 95 19 9 4
    各Buffer製品で処理できるカラムの個数の目安を示す
    詳細なバッファーの使用量はこちらをご覧ください

  • イソプロパノール(ACS試薬グレードまたは分子生物学グレード)

  • 96~100%エタノール(非変性、ACS試薬グレードまたは分子生物学グレード)


  • 器具
    • NucleoVac 96 Vacuum Regulator(推奨)(製品コード 740641)

    • ペリスタポンプ(チューブ厚1.6 mm)
      流量:最小 10 ml/min (内径 1.6 mm チューブ)
      最大20 ml/min (内径 3.1 mm チューブ)
      圧力: 最大 3.5 kg/cm2 (50 psi)、通常 18 psi

      【適合性確認済みのポンプとポンプヘッドの組み合わせの例】
      • Lead Fluid BT100 L+YT15
      • Integra Biosciences DOSE IT Peristaltic Pump
      • Heidolph HeiFLOW Precision 01+SP quick(SWS 1,6)

    • PharMed BPT チューブ(推奨)(Saint-Gobain または同等品)
      推奨されるチューブ材料: TPE製(pyrogen-free、滅菌済み)
      ※用途に応じて、 FDA USPなどの基準を満たしていることを確認してください。

    • FPLC、HPLCシステム(例:ÄKTApureシステム)
      ※少なくとも10 ml/minの流量と 100 psiの最大背面圧が必要
      ※使用前にライセートの清澄化が必要

    • ライセートろ過システム
      • NucleoBond Bottle Top Filter Type 2 (推奨)(製品コード 740553.5)
        1,000 mlまでのフロースルーに対応
        ※使用には吸引フラスコが必要

      • ペリスタポンプ対応のフィルターカートリッジ(20、5、0.45 μm)
        ※パイロジェンフリーが望ましい
      など

    フィルターカートリッジ、チューブ、コネクターの詳細はユーザーマニュアルをご覧ください。

    操作フロー

    NucleoBond RS

    用途

    レンチウイルス/AAV IVT-RNA(mRNA など)などのアプリケーションの出発材料としての高品質プラスミドDNA精製
    ワクチングレードの低エンドトキシン濃度(≦0.01 EU/μg DNA)プラスミドDNAの大規模調製

    NucleoBondはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。
    ÄKTAはCytiva社のトレードマークです。
    注意事項
    • 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
    • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
    • タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
      また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。
    • ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。