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Premix Ex Taq (Probe qPCR)は、TaKaRa qPCR Probeなどプローブを用いたリアルタイムPCR（qPCR）検出用の製品である。2×濃度のプレミックスタイプ試薬のため、反応液の調製が簡単である。さらに耐熱性RNaseHであるTli RNaseHがあらかじめ2×プレミックス試薬中に添加されており、cDNAを鋳型とした場合、残存mRNAによるPCR反応阻害を極限まで排除できる。抗Taq抗体を利用したホットスタートPCR用酵素TaKaRa Ex Taq HSとリアルタイムPCR用に最適化されたバッファーの組み合わせにより、非特異的増幅を抑制し、高い増幅効率、高い検出感度でリアルタイムPCRを行うことができる。高速PCRに適しており、幅広いダイナミックレンジで正確なターゲットの定量、検出が行え、さらに再現性よく信頼性の高いリアルタイムPCR解析が可能である。

本製品を2ステップRT-qPCRに使用する場合には、PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)（製品コード RR037A/B）との組み合わせを推奨する。プローブアッセイ用の逆転写反応プロトコールを用意している。PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)（製品コード RR047A/B）、PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time)（製品コード RR036A/B）との組み合わせも便利である。

なお、本製品はThermal Cycler Dice Real Time Systemに最適化しているが以下のリアルタイムPCR装置でも使用例がある。
技術情報のProtocolsを参照してください。（詳しくは弊社までお問い合わせください。）

• Thermal Cycler Dice Real Time System III（製品コード TP950/TP970/TP980/TP990）
• Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960）
• Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760)
• Applied Biosystems7300/7500/7500 Fast Real-Time PCR SystemおよびStepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
• LightCycler/LightCycler 480システム（Roche Diagnostics社）
• Smart Cycler System /Smart Cycler II System（Cepheid社）
• CFX96リアルタイムPCR解析システム（BIO-RAD社）

など

（200反応分）

Premix Ex Taq (Probe qPCR) (2×conc.)*1	1 ml×5
ROX Reference Dye (50×conc.)*2	200 μl
ROX Reference Dye II (50×conc.)*2	200 μl

*1 TaKaRa Ex Taq HS, dNTP Mixture, Mg^2＋, Tli RNaseHを含む。

1. リアルタイムPCR装置（authorized instruments）
2. 専用反応チューブあるいはプレート
3. PCR用プライマー
4. 検出用プローブ：TaKaRa qPCR Probeなど
5. 滅菌精製水
6. マイクロピペットおよびチップ（オートクレーブ処理したもの）

－20 ℃

4℃保存：6ヵ月安定
コンタミネーションには十分注意してください。

※ 長期保存の場合、－20℃で凍結保存することが可能です。いったん融解したものは4℃保存し、6ヵ月を目途にご使用ください。

TaKaRa qPCR Probeなどプローブ検出によるリアルタイムPCR

• 各社リアルタイムPCR装置で高い特異性を実現
  ABI 7500/7500 Fast、StepOnePlus、Smart Cycler System、LightCyclerなど各社リアルタイムPCR装置で特異性の高い結果が得られる。 ROX Reference Dyeが添付されているため、補正用dyeを必要とする機種にも確実に対応できる。
• 高速リアルタイムPCRにも最適
  高速リアルタイムにも最適化されているため、よりスピーディーな実験が可能。
• 優れたPCR反応性
  TaKaRa Ex Taq HSを使用しているため増幅効率が高く、低濃度の鋳型でも高感度に検出できる。非特異的な増幅が抑えられ、 幅広いダイナミックレンジにおいて高い直線性が得られる。
• 簡単で便利なプレミックスタイプ
  2×濃度のプレミックスタイプ試薬であり、反応液の調製が簡単。
• 耐熱性RNaseHでPCR反応阻害を極限まで排除
  2×プレミックス試薬中に、耐熱性RNaseHであるTli RNaseHをあらかじめ添加している。cDNAを鋳型とした場合の、 残存mRNAによるPCR反応阻害を極限まで排除できる。

1. 使用時には、泡立てないよう穏やかに転倒混和し、試薬を均一にしてから使用してください。試薬が完全に混和されていない場合、十分な反応性が得られなくなります。ボルテックスによる混合は行わないでください。 なお、Premix Ex Taq (Probe qPCR) (2×conc.) を－20℃で凍結保存した場合、保存中に沈殿を生じることがあります。軽く手で温めるか室温にしばらく置いた後、転倒混和することで完全に溶解します。必ず均一に混合してからご使用ください。
2. 融解した試薬はただちに氷上に置いてください。
3. 本製品はプローブを含んでいません。別途準備してください。
4. 反応液の調製、分注を行う時は必ず新しいディスポーザブルチップを用い、サンプル間のコンタミネーションを極力防止してください。

TaKaRa qPCR Probeについてはこちら

プライマー・プローブ合成 （TaKaRa qPCR Probe）

リアルタイムPCR関連実験の各種手法をホームページでご紹介しています。あわせてご参照ください。