本酵素は、鋳型、プライマー（DNAおよびRNAともに可）存在下でdNTPを基質とし、鋳型に相補的なDNAを5’→3’方向に合成する。また、二本鎖特異的5’→3’ exonuclease活性および一本鎖特異的3’→5’ exonuclease活性も有している。

－20℃

3～6 U/μl

50 mM	リン酸カリウム緩衝液（pH6.5）
1 mM	DTT
50％	グリセロール

500 mM	Tris-HCl（pH7.8）
100 mM	MgCl2
1 mM	DTT

ポリd（A-T）合成DNAを鋳型/プライマーとして用い、37℃、pH7.4において、30分間に10 nmolの全ヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む酵素活性を1 Uとする。

67 mM	リン酸カリウム緩衝液（pH7.4)
6.7 mM	MgCl2
0.1 mM	DTT
20 μM	ポリd (A-T)
33 μM	dATP
33 μM	[3H]dTTP

SDS電気泳動で90％以上の純度を示す。
10 Uの本酵素と、1 μgのclosed circular（RF I）pBR322 DNAとを37℃、1時間反応させても、DNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。

• 本酵素は、希釈による活性低下は起こらないが、強く撹拌すると失活することがある。
• endonucleaseを含まないため、単独ではほとんどニックトランスレーション活性を示さない。
• DNAと強い親和性があるため、過剰に用いるとaggregationが起こり、反応が充分進まないことがある。

• DNase I（製品コード 2270）との併用によるニックトランスレーション²⁾
• Okayama-Berg法³⁾におけるsecond strand DNA鎖の合成反応(DNA Polymerase I 0.3 μgは約2.5 Uに相当する）

Escherichia coli carrying the plasmid which encodes the gene of Pol I

1. 5'→3' DNA polymerase活性
鋳型、プライマー（DNA、RNA共に可）存在下でdNTPを基質とし、鋳型に相補的なDNAを5'→3'方向に合成する。

polymerase活性による反応には以下の3種類がある

●	gap filling	：	二本鎖DNAのギャップ部分の3'-OH基にヌクレオチドを付加し、その一本鎖部分を埋める。
●	nick translation	：	二本鎖DNAのニック部分の3'-OH末端にヌクレオチドを付加し、同時に5'末端のヌクレオチドをexonucleolyticに除去する。
●	strand displacement	：	ニック部分の3'-OH末端にヌクレオチドを付加することにより、5'末端を持つ鎖を置換する。

2. 二本鎖特異的5'→3'exonuclease活性

損傷を受けたヌクレオチドを除去する。
DNA/RNAハイブリッド中のRNAも分解する。

3. 一本鎖特異的3'→5'exonuclease活性

複製のfidelityに関与している。2. とは異なるドメインに存在する。

• 分子量
  109,000
• サブユニット
  1分子中にZn^2＋Mを1分子含む一本鎖単純ポリペプチド
• 至適pH
  pH7.4
• 補因子
  Mg^2＋
• 安定性
  激しい撹拌により失活する。
• 至適塩濃度
  100 mM KCl