デレーションミュータントの作製に

Kilo-Sequence用 Deletion Kit

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR 6030 6030 Kilo-Sequence用 Deletion Kit
  • 労働安全衛生法
  • 安全データシート(SDS)添付
  • バルクなど特別対応可能
5回 ¥30,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

本製品はM13系またはpUC系ベクターなどに組み込まれたDNA断片を末端から分解し、種々の大きさの断片を含むクローンを得るためのキットである。これにより、長鎖のDNAシーケンシングを行うことができ、また目的の領域だけを含むクローンの調製等にも適している。本キットはHenikoffの方法およびYanisch-Perronらの方法を改良したものである。

内容

(5回分)
Exonuclease III(180 U/μl) 10 μl
Exo III Buffer 500 μl
Mung Bean Nuclease(25 U/μl) 20 μl
MB Nuclease Buffer 500 μl
Klenow Fragment(2 U/μl) 10 μl
Klenow Buffer 250 μl
Ligation Solution A * 500 μl
Ligation Solution B * 60 μl

* Ligation Solution A, B は、DNA Ligation Kit Ver.1(製品コード 6021)に含まれる試薬と同じものである。

保存

-20℃

長鎖DNAのシーケンシングの原理

本製品は、Exonuclease IIIの3’-recessed endまたはblunt endからの二本鎖特異的な3’→ 5’exonuclease活性を利用したDNAの一本鎖化と、Mung Bean Nucleaseによる一本鎖DNAの分解とを組み合わせてM13、pUC系ベクターなどに組み込まれたDNA断片を末端より分解し、種々の大きさの断片を含むクローンを効率良く得るためのキットである。このキットにより、長鎖のDNAシーケンシングに必要な一連のデリーションミュータントを作製できる他、目的の領域だけを含むクローンの調製等にも利用できる。

図1 M13 mp18 BamH I siteにクローニングされたDNA断片をデリーションさせる場合

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