植物形質転換用バイナリーベクター

pRI 909/910 DNA

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR 3260 3260 pRI 909 DNA
10 μg ¥53,000
説明書・データシート・ベクター情報
TKR 3261 3261 pRI 910 DNA
10 μg ¥53,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

本製品は、植物形質転換用のT-DNA領域を含むバイナリーベクターである。RhizobiumAgrobacteriumrhizogenesのRiプラスミド由来であるがvir領域は含まない。本ベクターは、大腸菌およびRhizobiumAgrobacterium)中で自律的に複製するシャトルベクターでもある。
pUC系のプラスミドと同じ複製起点(ColE1 ori)を含むために大腸菌では高コピー数のプラスミドとして維持され、Riプラスミド由来の変異型複製起点(Ri-ori)を含むのでRhizobiumAgrobacterium)中でも安定に維持される。大腸菌、RhizobiumAgrobacterium)での選択マーカーとしてカナマイシン耐性遺伝子NPT IIIを、植物での選択マーカーとして変異型カナマイシン耐性遺伝子NPT IIを含んでいる。クローニングサイトとしてpUC系のプラスミドに使われる制限酵素切断部位が使用できる。
クローニングサイトに発現カセット(プロモーター+目的遺伝子+ターミネーター)を導入して使用する。
本ベクターをバイナリーベクター法による植物形質転換に使用できるRhizobiumAgrobacterium)と組み合わせることにより、植物形質転換に用いることができる。また、クローニングサイトが植物の選択マーカー(NPT II)に対してT-DNAのRight Border(RB)側に配置されているため、目的遺伝子が欠失することなく、安定に植物染色体への組込みが可能となる。

保存

-20℃

濃度

0.5μg/μl

形状

10 mMTris-HCl, pH8.0
1 mMEDTA

調製

カラム処理によりプラスミドDNAを精製。

鎖長

9,168 bp

pRI909, pRI910のDNAシーケンスデータ

pRI909(Fasta形式のテキストデータ)
pRI910(Fasta形式のテキストデータ)
Fasta形式 : ホモロジー検索のデータベースや配列を扱う各種ツールに使用する際によく使われるファイル形式で、一行目の>の後ろにファイル情報(ベクター名)を入れています。
配列部分は、60塩基ごとに改行した形です。

純度

  1. Dideoxy法によるシーケンスの結果、クローニングサイトが保持されていることを確認している。
  2. クローニングサイトにおいてのみ1ヵ所切断する制限酵素について、その切断を確認している。

用途

バイナリーベクター法により、アグロバクテリウムを介して植物の形質転換を行うためのベクター。シロイヌナズナ、トマト、タバコ、イネなどの形質転換に使用。
使用できる代表的なアグロバクテリウムとしてはRhizobium radiobactor (Agrobacterium tumefaciens) LBA4404があり、この菌株のエレクトロポレーション法用のコンピテントセルとしてAgrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells(製品コード9115)がある。

pRI 909/910 DNAのベクターマップ

pRI 909とpRI 910では、MCSおよびその周辺配列が逆向きです。


ColE1 ori:大腸菌での複製起点
Ri ori:RhizobiumAgrobacterium)での複製起点
RB, LB:植物染色体に組み込まれるT-DNAのボーダー配列
NOS-promoter, NOS-terminator:植物での選択マーカー遺伝子発現のためのプロモーターおよびターミネーター
NPT II:植物での選択マーカー遺伝子
NPT III:大腸菌およびRhizobiumAgrobacterium)での選択マーカー遺伝子(カナマイシン耐性)

クローニングサイト図

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