植物形質転換用高発現ベクター

pRI 101 DNAシリーズ

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR 3262 3262 pRI 101-AN DNA
  • バルクなど特別対応可能
10 μg ¥53,000
説明書・データシート・ベクター情報
TKR 3263 3263 pRI 101-ON DNA
  • バルクなど特別対応可能
10 μg ¥53,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

pRI 101 DNAシリーズは、形質転換植物における外来遺伝子の高発現を目的としたベクターである。カリフラワーモザイクウイルス(CaMV)の35Sプロモーターの下流にADH(Alcohol Dehydrogenase)遺伝子由来の5’非翻訳領域(5’-UTR)を搭載しており、当該領域の持つ翻訳エンハンサー機能により、植物体での目的遺伝子産物の高発現が期待できる1)。シロイヌナズナADH由来5’-UTR(AtADH 5’-UTR)を搭載したpRI 101-AN DNAとイネADH由来5’-UTR(OsADH 5’-UTR)を搭載したpRI 101-ON DNAの2種類があり、双子葉植物にはpRI 101-AN DNA、単子葉植物にはpRI 101-ON DNAが使用できる。
また、本シリーズは植物形質転換用バイナリーベクターpRI 910 DNA(製品コード 3261)をバックボーンとしたバイナリーベクターであり、Rhizobium rhizogenesのRiプラスミド由来の変異型複製起点(Ri ori)を持っている2)
さらに、pRI 910 DNAと同様、pUC系のプラスミドと同じ複製起点(ColE1 ori)を持つために大腸菌で高コピー数のプラスミドとして維持され、また、クローニングサイトが植物の選択マーカーに対してT-DNAのRight Border(RB)側に配置されているため目的遺伝子が欠失することなく安定に植物染色体に組込み可能になる。
本ベクターは、国立大学法人 奈良先端科学技術大学院大学より技術および試料の提供を受けて、タカラバイオが製品化しました。

内容

pRI 101-AN DNA(製品コード 3262)  10 μg
pRI 101-ON DNA(製品コード 3263)  10 μg
・濃度0.5 μg/μl
・形状10 mM Tris-HCl, pH8.0
1 mM EDTA

保存

-20℃

鎖長

pRI 101-AN DNA10,417 bp
pRI 101-ON DNA10,454 bp

pRI 101-AN DNA、pRI 101-ON DNAのシーケンスデータ

pRI 101-AN(Fasta形式のテキストデータ)
pRI 101-ON(Fasta形式のテキストデータ)
Fasta形式 : ホモロジー検索のデータベースや配列を扱う各種ツールに使用する際によく使われるファイル形式で、一行目の>の後ろにファイル情報(ベクター名)を入れています。
配列部分は、60塩基ごとに改行した形です。

純度

  1. Dideoxy 法によるシーケンスの結果、クローニングサイトが保持されていることを確認している。
  2. クローニングサイトにおいてのみ1ヵ所切断する制限酵素について、その切断を確認している。

用途

バイナリーベクター法により、アグロバクテリウムを介して植物の形質転換を行うためのベクター。シロイヌナズナ、トマト、タバコなどの双子葉植物(pRI 101-AN DNAを使用)あるいはイネなどの単子葉植物(pRI 101-ON DNAを使用)の形質転換、および外来遺伝子の高発現を実現。
使用できる代表的なアグロバクテリウムとしてはRhizobium radiobactor (Agrobacterium tumefaciens) LBA4404があり、この菌株のエレクトロポレーション法用のコンピテントセルとしてAgrobacterium tumefaciens LBA4404 Electro-Cells(製品コード9115)がある。

pRI 101-AN DNA、pRI 101-ON DNAのベクターマップ

pRI 101-AN DNA

pRI 101-ON DNA

ColE1 ori:大腸菌での複製起点
Ri ori:RhizobiumAgrobacterium)での複製起点
RB, LB:植物体に組み込まれる T-DNAのボーダー配列
NOS-promoter, NOS-terminator:植物での遺伝子発現のためのプロモーター、ターミネーター
NPT II:植物での選択マーカー遺伝子
AtADH 5’-UTR, OsADH 5’-UTR:翻訳エンハンサー領域
35S promoter:植物での遺伝子発現のためのプロモーター(CaMV由来)
NPT III:大腸菌およびRhizobiumAgrobacterium)での選択マーカー遺伝子(カナマイシン耐性)

クローニングサイト図

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