製品説明
TB Green Premix DimerEraser (Perfect Real Time) は、インターカレーター法によるリアルタイムPCR専用試薬である。2×プレミックスタイプの試薬で、リアルタイムモニタリングに適した濃度のインターカレーターTB Greenをあらかじめ含んでおり、反応液の調製が簡単にできる。
本製品は、独自のアクセサリータンパク質の添加とバッファー組成の改変により、TB Green Premixシリーズの試薬の中で最も高い反応特異性を提供することができる。特にインターカレーター法において問題となるプライマーダイマーの抑制に効果的である。
標準プロトコールとして3 step PCRを推奨しており、若干反応時間を要するが、非特異的増幅を抑制し微量な鋳型まで高感度に検出できるので、幅広い鋳型濃度範囲で信頼性の高い定量が可能である。
なお、本製品はThermal Cycler Dice Real Time Systemに最適化しているが下記の装置でも使用例がある。
技術情報のProtocolsを参照してください。
（詳しくは弊社までお問い合わせください。）
本製品は、独自のアクセサリータンパク質の添加とバッファー組成の改変により、TB Green Premixシリーズの試薬の中で最も高い反応特異性を提供することができる。特にインターカレーター法において問題となるプライマーダイマーの抑制に効果的である。
標準プロトコールとして3 step PCRを推奨しており、若干反応時間を要するが、非特異的増幅を抑制し微量な鋳型まで高感度に検出できるので、幅広い鋳型濃度範囲で信頼性の高い定量が可能である。
なお、本製品はThermal Cycler Dice Real Time Systemに最適化しているが下記の装置でも使用例がある。
技術情報のProtocolsを参照してください。
（詳しくは弊社までお問い合わせください。）
- Thermal Cycler Dice Real Time System III（製品コード TP950/TP970/TP980/TP990）
- Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
- Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
- CronoSTAR 96 Real-Time PCR System（製品コード 640231/640232）
- Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System
StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社） - LightCycler/LightCycler 480 System（Roche Diagnostics社）
内容
| TB Green Premix DimerEraser (Perfect Real Time) (2×conc.) *1 | 1 ml×5 |
| ROX Reference Dye (50×conc.) *2 | 200 μl |
| ROX Reference Dye II (50×conc.) *2 | 200 μl |
*1 TaKaRa Ex Taq HS、dNTP Mixture、Mg2+およびTB Greenを含む。
*2 Applied BiosystemsのリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用します。
-
ROX Reference Dye を添加する機種
StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社） -
ROX Reference Dye IIを添加する機種
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社） -
添加の必要がない機種
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ（製品コード TP950/TP970/TP980/TP990、TP900/TP960/TP700/TP760：終売）
CronoSTAR 96 Real-Time PCR System（製品コード 640231/640232）
LightCycler/LightCycler 480 System（Roche Diagnostics社）
保存
4℃保存：6ヵ月安定
※必ず遮光してください。また、コンタミネーションには十分注意してください。
※必ず遮光してください。また、コンタミネーションには十分注意してください。
| ※ | 長期保存する場合は、－80℃で保存してください。（－20℃保存は避けてください。） いったん融解したものは4℃保存し、6ヵ月を目途にご使用ください。 |
特長
- リアルタイムPCRにより、遺伝子の検出、定量を迅速かつ正確に行うことが可能である。
- TB Greenがあらかじめミックスしてある2×conc.のプレミックス試薬である。プライマーとテンプレートと滅菌精製水を加えるだけでインターカレーター法によるリアルタイムPCRを行うことができる。
- PCRには、ホットスタートPCR用酵素TaKaRa Ex Taq HSを用いていており、サイクル前のミスプライミングに由来する非特異的増幅を防ぐことができる。さらに、アクセサリータンパク質の添加によりPCR中のミスプライミングも抑制し、プライマーダイマー等の非特異的増幅を強力に抑制する。
本製品以外に必要な試薬、機器（主なもの）
- リアルタイムPCR装置（authorized instruments）
- 専用反応チューブあるいはプレート
- PCR用プライマー
- 滅菌精製水
- マイクロピペットおよびチップ（オートクレーブ処理したもの）
使用上の注意
TB Green Premixシリーズで使用しているTaKaRa Ex Taq HSは抗Taq抗体を利用したホットスタートPCR用の酵素であり、化学修飾タイプの酵素のように95℃10～15分の活性化ステップは必要ありません。初期変性は通常、95℃30秒で十分です。
リアルタイムRT-PCR用プライマーを検索・注文できます。「Perfect Real Timeサポートシステム」
Perfect Real Timeサポートシステム for インターカレーターは、インターカレーター法（TB Green検出）によるリアルタイムRT-PCR用に最適化されたプライマーを検索・オンライン注文するためのシステムです。
ヒト、マウス、ラット、ウシ、イヌ、ニワトリなどのRefSeq登録遺伝子に対して網羅的にリアルタイムRT-PCR用のプライマーを設計しています。
ターゲット遺伝子を検索し、ご希望のプライマーセットを選択すれば簡単にオンラインで注文できます。わずらわしいプライマー設計と反応条件の至適化作業はもう不要です。siRNAの効果の確認、DNAマイクロアレイ解析結果の検証など遺伝子発現定量や遺伝子検出にどうぞお気軽にご利用ください。
サポートシステムはこちら
ヒト、マウス、ラット、ウシ、イヌ、ニワトリなどのRefSeq登録遺伝子に対して網羅的にリアルタイムRT-PCR用のプライマーを設計しています。
ターゲット遺伝子を検索し、ご希望のプライマーセットを選択すれば簡単にオンラインで注文できます。わずらわしいプライマー設計と反応条件の至適化作業はもう不要です。siRNAの効果の確認、DNAマイクロアレイ解析結果の検証など遺伝子発現定量や遺伝子検出にどうぞお気軽にご利用ください。
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リアルタイムPCR関連実験の各種手法をホームページでご紹介しています。あわせてご参照ください。
Protocols
Thermal Cycler Dice® Real Time System シリーズを用いる場合の操作方法
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR SystemおよびStepOnePlus Real-Time PCR System を用いる場合の操作方法
LightCycler®/LightCycler® 480システムを用いる場合の操作方法
Smart Cycler® II System を用いる場合の操作方法
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