pCold^™ユーザーズボイス集！

共同研究者からの評判。

いろいろなベクターを使って発現実験を行なってきたが，可溶性タンパク質が得られにくく困ったので。

予想以上にうまくいった。

文句ございません。満足です。

発現タンパク質が得られるまで，一日多くなりますが，その待ち時間が期待出来る結果への一歩だと思えるなら，是非使うべきです。

GSTタグ付きの特定酵素で切断されるタンパク発現用ベクターを探していて知った。

Xho、Ndeの切断酵素が使用でき、GSTタグのベクターだったため。

ゲルエクストラクションで遺伝子導入したが、失敗もなくすんなりと成功した。発現も温度管理である程度調整が可能なため使用しやすい。

低温可能な振とう機が必要なので、冷蔵庫だけでも
発現可能になれば幅広い人が使いやすくなると思った。

多様なマルチクローニングサイトと二つのタグがあり、温度による発現調整も可能なため万能性があると思います。使用可能な環境にあるなら持っておくといろんな場合で使えて便利です。

使用者からの口コミ。

使用者から進められた為。

良かった。

なし。

なし。

業者から頂いた広告を見て知った。

これまでにもGST融合タンパク質をpGEXベクターなどで作成していたが不溶性になるものもあり、低温で誘導することで改善できるのではないかと考え購入を決めました。

別のベクターでは不溶性になっていたタンパク質も、pColdシリーズでは可溶性画分として回収することができ、研究の進展に非常に役立った。

現時点では、ありません。

クローニングサイトも充実しており、使いやすいベクターだと思います。

文献中に載っていたため、調べてみたところ御社の製品であることがわかった。

線虫の水溶性タンパク質であるにもかかわらず、不溶の沈殿物として発現してしまうため、なんとか溶液中のタンパクとして発現させたかったため。

うまく発現しなかった。依然として不溶のままであった。

もう少しいろいろな用例集みたいなものがあると嬉しい。

いろいろ試して見ることが重要と思います。

業者が持ってきた資料で。

どうしても可溶化できなかったタンパク質があったので、もしかしたら上手くいくかと思ったので。

改善できなかった。

どのようなタンパク質が上手くいって、どのようなタンパク質が上手くいかないかの資料が欲しい。

選択肢の一つにはなると思います。

HP上に掲載されているのを見た。

GSTタグによる精製を検討していたがラボ内でノウハウがなかった。Hisタグに関してはカラム等設備が整っており、シャペロンとの共発現や低温誘導による夾雑物の低減等、pET系と比較して精製効率の向上が可能であると感じた。

15 kDa程度の標的タンパク質はpTf-16との共発現により粗精製に成功した。夾雑タンパク質の発現量も比較的少なく、精製の手間を省けたと感じている。

15℃に対応した水浴槽がなく、氷水中で温度を計測しつつコールドショックを与えるというアナログな方法で誘導をかけている。誘導温度の違いによる発現量変化等が知られていれば、掲載されると参考にできると思う。

pETからの乗り換えなら設備投資等を抑えて発現・精製効率の改善が可能だと感じた。

タカラのカタログで知りました。

組換えタンパク質の可溶性発現に日頃苦労しており、その解決策の一環として導入しました。

試した殆どのタンパク質をタグ付き条件下で可溶性発現させることができ、極めて優れたシステムであることを確認しました。

タグの切り離し時に不溶化してしまう所見は時折認められました。成熟タンパク質の可溶性を保持できるような仕掛けがあると更に優れたシステムになろうかと思われます。またTFタグの低分子化、およびフリーのTFタグにanti-His抗体が当たりにくい所見についても改善の余地があろうかと思われます。更にはanti-TF抗体を製品ラインアップして頂くことも有用かと思われます。

組換えタンパク質の可溶性発現が困難な場合の第一選択肢になり得るシステムであると思われます。