TaKaRa LA Taq^® Hot Start Version

TaKaRa LA Taqは、LA PCRの原理を応用した3’→5’exonuclease活性（proof reading活性）を持つ耐熱性DNA Polymeraseである。通常のPCR条件下において、従来のTaq DNA Polymeraseと比べて高い増幅効率が期待でき、基本的にどのような鋳型DNAにも適用できるが、特に15 kb以上の増幅には効果的である。
本製品に使用しているTaKaRa LA Taq HSは、抗Taq抗体とTaKaRa LA Taqを混合したもので、ホットスタートPCR用の酵素である。 高温に加熱するまでは抗Taq抗体が酵素に結合しポリメラーゼ活性を抑えているため、サイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を防ぐことができる。抗Taq抗体はPCRの最初のDNA変性ステップで変性するため、特別な変性ステップは必要なく、従来のPCR条件で使用できる。

（125 U）

TaKaRa LA Taq HS （5 U/μl）	25 μl
10×LA PCR Buffer II （Mg2＋ plus）	1 ml
dNTP Mixture （各2.5 mM）	400 μl

－20℃

濃度	各2.5 mM
形状	水溶液（ナトリウム塩）pH7～9
純度	各98％以上

* dATP、dCTP、dGTP、dTTPの等モル混合物で、希釈せずにそのままPCR反応に用いることができる。

活性化サケ精子DNAを鋳型／プライマーとして用い、下記の活性測定用反応液中にて74℃において、30分間に10 nmolの全ヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む活性を1 Uとする。

●10 Uの本酵素と0.6 μgのλ-Hind III分解物を74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●10 Uの本酵素と0.6 μgのsupercoiled pBR322 DNAを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●10 Uの本酵素と0.6 μgのλDNAを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない

Hot Start PCR法によるDNA増幅、特に長鎖の増幅に最適。

TaKaRa LA Taq HS を用いて増幅したPCR産物のほとんどは、3'末端にAが1塩基付加されている。したがって、そのPCR産物をそのままT-Vector［pMD20（製品コード 3270）、pMD19 (Simple)（製品コード 3271）など］にクローニングすることができる。ただし、長鎖のPCR産物（5 kb以上）のT-Vectorへのクローニングは効率がかなり悪くなる。
また、末端平滑化およびリン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることも可能である。

性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。

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