5'-Full RACE Core Set

本製品は、RACE（Rapid Amplification of cDNA End）法を用いてmRNAの5’部分の増幅を行うためのCore Setである。mRNAから完全長のcDNAを得ることはきわめて重要であるが、非常に困難であることが多い。このような場合、得られたcDNAの情報をもとにさらに上流や下流をクローニングする方法がRACE法である。本製品を用いることにより、inverse PCRを利用して未知の5’末端領域を増幅し、5’-RACE法を効率よく行うことができる。本製品はRNAからのcDNA合成、およびcDNAのコンカテマー化(あるいは環状化）に必要なすべての試薬を含んでいる。

AMV Reverse Transcriptase XL（5 U/μl）	10 μl
RNase Inhibitor （40 U/μl）	10 μl
10×RT Buffer	15 μl
RNase Free dH2O	1 ml
RNase H （60 U/μl）	10 μl
5×Hybrid RNA Degradation Buffer	150 μl
T4 RNA Ligase （40 U/μl）	10 μl
5×RNA (ssDNA) Ligation Buffer	80 μl
40％ PEG #6000	200 μl
Positive Control RT-Primer （200 pmol/μl）*	10 μl
Positive Control 1st Primer Pair （各primer 20 pmol/μl）*	10 μl
Positive Control 2nd Primer Pair （各primer 20 pmol/μl）*	10 μl
Positive Control RNA （10 ng/μl）	10 μl

*　Positive Control RNAを用いて増幅するためのプライマー

－20℃

Positive Control RT-Primer	5’-(P)AAAATGACCCAG-3’
Positive Control 1st Primer Pair	S1：5’-AGCGCTTGTTTCGGCGTGGGTATGGTG-3’ A1：5’-CTGGCGATGCTGTCGGAATGGACGATA-3’
Positive Control 2nd Primer Pair	S2：5’-ACCTACTACTGGGCTGCTTCCTAATGC-3’ A2：5’-TAGATTTCATACACGGTGCCTGACTGC-3’

注意）上記のプライマーは、キットに含まれるPositive Control RNAを用いて増幅するためのプライマーです。

• TaKaRa Taq （製品コード R001A/B/C）またはTaKaRa Ex Taq （製品コード RR001A/B/C）またはTaKaRa LA Taq （製品コード RR002A/B） など
• 5’末端リン酸化RT-プライマー（逆転写反応に使用）
• 1st PCR用プライマーペア（1st PCRに使用）
• 2nd PCR用プライマーペア（2nd PCRに使用）