In-Fusion® Snap Assembly EcoDry™ Master Mix

凍結乾燥タイプで取り扱い便利なクローニングキット
  • 任意のベクターの任意の位置にディレクショナルクローニングが可能
  • 0.5~15 kbインサートについて、95%以上の高効率でクローニングが可能
  • 一挙に複数DNA断片を挿入するマルチクローニングの効率が向上
  • マイクロチューブに分注済みの凍結乾燥タイプで、直ちに使用可能
  • ハイスループットクローニングにも最適
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
638954

CLN

Clontech
In-Fusion® Snap Assembly EcoDry™ Master Mix
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library 取寄
8回 ¥26,000
¥20,800
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z8954N
638955

CLN

Clontech
In-Fusion® Snap Assembly EcoDry™ Master Mix
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library 取寄
32回 ¥76,000
¥60,800
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z8955N
638956

CLN

Clontech
In-Fusion® Snap Assembly EcoDry™ Master Mix
クローニング関連、In-Fusion、cDNA Library 取寄
96回 ¥208,000
¥166,400
2023/11/27~
2024/03/29

説明書・データシート・ベクター情報
Z8956N
※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。
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製品説明

In-Fusion Snap Assembly EcoDry Master Mixは、室温で保存できる便利な凍結乾燥タイプのIn-Fusionクローニング試薬である。
In-Fusionクローニングは、PCR断片と線状化ベクターの両末端15塩基の相同配列を利用して効率よくクローニングする方法で、わずか15分間の反応で1個~複数のPCR断片を任意のベクターの任意のサイトへ設計通りに挿入することができる。
15塩基の相同配列はPCR用プライマーの設計により容易に付加できる。In-Fusion反応によって線状DNAの3'末端から塩基が除去され、2個のDNA断片間で生じる相補的塩基によりアニーリングが可能となり、DNA断片の結合が起こる。この原理により1個から複数の断片のクローニングが可能となる。さらに、変異導入、遺伝子合成、特定遺伝子領域の変換などにも利用できる。クローニングするPCR断片に対し、制限酵素処理、リン酸化、平滑末端化は不要である。
本製品の各チューブにはプレミックスのIn-Fusion Snap Assembly試薬が乾燥状態で含まれており、アルミシールでカバーされている。線状化ベクターとインサート、滅菌水を加えるだけで反応を開始することができるため、作業効率の向上とコンタミネーションリスクの低減を図ることができ、自動化装置にも適している。
In-Fusion Snap Assembly EcoDry Master Mixは、クローニング効率が95%以上で、ハイスループットクローニングにも適している。製品には、8連チューブ(製品コード 638954、638955)と96ウェルプレート(製品コード 638956)の2種類のタイプを用意している。

他社同等品との違いはこちら
In-Fusionと他社シームレスクローニングキットは何が違うの?

In-fusionのプロトコル
図1.プロトコール

In-Fusionプライマーの設計

In-Fusionクローニング用プライマーの設計および目的DNA断片の増幅は、基本的に通常のPCRプライマーの設計、PCR増幅と同じである。唯一の違いは、利用するベクターの末端配列に相同な15塩基を、配列特異的プライマーの5’末端に付加することである(下図参照)。

お手持ちのベクターに対するIn-Fusion用プライマーの設計には、便利なオンラインツール「In-Fusion HDプライマー設計サイト(The Primer Design Tool for In-Fusion HD Cloning Kit)」をご利用ください。
In-Fusion Cloning プライマー設計・注文
in-fusionクローニングの原理

内容

  • In-Fusion Snap Assembly EcoDry Master Mix
     製品コード 638954(8回):8-well strip×1
     製品コード 638955(32回):8-well strip×4
     製品コード 638956(96回):96-well plate×1
  • pUC19 Control Vector, linearized
  • 2 kb Control Insert
PCR産物の精製には別途、NucleoSpin Gel and PCR Clean-up(製品コード 740609.10)などの精製用スピンカラムをご用意ください。
キットにはコンピテントセルが添付されていません。形質転換には、効率の高いE. coli HST08 Premium Competent Cells(製品コード 9128)などをご利用ください。
PCRによるインサートDNAの作製やベクターのインバースPCRには正確性が高いPrimeSTAR Max DNA Polymerase(製品コード R045A/B)の使用をおすすめします。

保存

In-Fusion Snap Assembly EcoDry Master Mix:デシケーター内で室温保存
pUC19 Control Vector, linearized、2 kb Control Insert:-20℃
注意事項
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