製品説明
Lyo-Ready One Step PrimeScript III RT-qPCR Mixは、蛍光プローブ法によるOneStepリアルタイムPCR用の凍結乾燥用のマスターミックスです。賦形剤を予め含んでいるため、プライマー、プローブを添加するだけで任意の量に分注して凍結乾燥することができます。凍結乾燥後のマスターミックスは、室温で保管、輸送ができ、大量のサンプルにも柔軟に対応することができます。本製品には2×濃度の凍結乾燥用マスターミックスが1 ml含まれており、20 μl反応100回分に相当します。本製品はOne Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(製品コード RR600A/B)をベースに開発され、同等の性能を持つことを確認しています。
Lyophilized One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(製品コード 638346)は、凍結乾燥済みのテスト用の小容量品です。目的のプライマー、プローブを用いた性能評価に利用することができます。
注)本製品を用いた反応液調製は氷上で行ってください。
内容
Lyo-Ready One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(製品コード 638345)
Lyo-Ready One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (2X) 1 ml(溶液品)
Lyophilized One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(製品コード 638346)
Lyophilized One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix 8-tube strips×3(凍結乾燥品)
保存
Lyo-Ready One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(製品コード 638345) -20℃
Lyophilized One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(製品コード 638346) 室温
性能評価データ
図1.Lyo-Ready / Lyophilized One Step PrimeScript III RT-qPCR Mixと元製品の性能比較
human RNAの7段階希釈系列を鋳型として、human GAPDH検出用primers/probesを用いてLyo-Ready One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(製品コード 638345)、Lyophilized One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(製品コード 638346)と元製品のOne Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(製品コード RR600A/B)のダイナミックレンジの比較を行った(N=3)。3種類の試薬で、全ての鋳型濃度において同等の結果が得られており、試薬の同等性が示された。
図2.Lyo-Ready One Step PrimeScript III RT-qPCR Mixのマルチプレックスアッセイ性能評価
human RNAの5段階希釈系列を鋳型として、Lyo-Ready One Step PrimeScript III RT-qPCR MixでACTB、GAPDH、HRPT1、PPA、RNAsePの5種類のプライマー、プローブセットを用いた5プレックスRT-qPCRを実施した。全ての遺伝子の標準曲線プロットで同等の増幅効率、R
2値が得られた。
本キット以外に必要な試薬、機器(主なもの)
- 凍結乾燥機(例: SP VirTis Genesis Pilot Freeze Dryer、 SP VirTis Ultra Pilot-Production Freeze Dryer(ATS Automation Tooling Systems, Inc.)など)
- リアルタイムPCR装置
- 専用反応チューブあるいはプレート
- PCR用プライマー
- 検出用プローブ(PRTSS for プローブなど)
- マイクロピペットおよびチップ(オートクレーブ処理したもの)