本製品は、優れた伸長性と非常に高い増幅効率を提供する2ステップRT-PCR用のキットである。逆転写反応にはM-MLV由来のRTaseをベースにしてタカラバイオが独自に開発した逆転写酵素PrimeScript RTaseを採用し、PCRには増幅効率に優れたホットスタートPCR用酵素
TaKaRa Ex Taq HSを用い、2ステップRT-PCR用に至適化している。さらにタカラバイオのRT-PCR テクノロジーを組み合わせることにより、次のような特長を示す。
- 非常に効率よくRT-PCR増幅産物が得られる。
- 標準的な逆転写反応温度(42℃)で、高次構造を取り得る鋳型RNAにも優れた伸長性を示す。RNAが分解されるリスクのある高温での反応は不要。
- 反応液調製時などサイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を抑制する。
(50回分)
*1
1. |
PrimeScript RTase (for 2step) |
25 μl |
2. |
5×PrimeScript Buffer |
200 μl |
3. |
RNase Inhibitor (40 U/μl) |
25 μl |
4. |
dNTP Mixture (10 mM each) |
150 μl |
5. |
Oligo dT Primer (2.5 μM) |
50 μl |
6. |
Random 6 mers (20 μM) |
50 μl |
7. |
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) |
25 μl |
8. |
10×PCR Buffer II |
250 μl |
9. |
Control F-1 Primer*2 (20 μM) |
10 μl |
10. |
Control R-1 Primer*3 (20 μM) |
10 μl |
11. |
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) | 20 μl |
12. |
RNase Free dH2O |
1 ml |
*1 [ 逆転写反応系20 μl → PCR 反応系50 μl ] の場合の50 回分
*2 Positive Control RNA用上流センスプライマー
*3 Positive Control RNA用下流アンチセンスプライマー