- 高誘導性のTet-On細胞株
- 目的遺伝子の発現誘導システムの迅速な構築
- Tetシステム細胞株により、システム構築の時間と労力を削減
製品説明
Tet-On 3G（第3世代）、Tet-On Advanced（第2世代）およびTet-On（第1世代）Cell Lineは、テトラサイクリン発現誘導システムの、リバーステトラサイクリン制御性トランス活性化因子（rtTA）を安定的に発現する細胞株である。テトラサイクリン応答因子（TRE）promoter制御下で目的遺伝子を発現するベクターをTet-On細胞株に導入するだけで、ドキシサイクリン（Dox）存在下で目的遺伝子の発現を誘導することができる。
システム構築にかかる時間を大幅短縮
システムの構築は簡単に行うことができる。まず、TREプロモーター（PTRE3Gなど）の下流に目的遺伝子をクローニングし、その後、このプラスミドをTet-On細胞株（G418-耐性）に導入し、安定発現株の選抜を行う。rtTAを安定的に発現する本細胞株を用いることにより、Tet-Onシステムの構築に要する時間を約2ヵ月間短縮することができる。
図1. Tet-Onシステムの発現誘導原理
リバーステトラサイクリン制御性トランス活性化因子（rtTA）は、ドキシサイクリン（Dox）の存在下でテトラサイクリン応答因子（TRE）プロモーターに結合し目的遺伝子の発現を活性化する。Tet-On Cell LineはこのrtTAを安定的に発現する細胞株である（図は第1世代のTet-On Systemを示す）。
図2. HEK 293 Tet-On Advanced Cell Lineを用いたルシフェラーゼ遺伝子の発現誘導
HEK 293 Tet-On Advanced Cell LineにpTRE-Tight-luciferase vectorを導入し、Dox存在下と非存在下での発現を確認した。Dox存在下ではルシフェラーゼの高い発現が確認できるが、Dox非存在下では基底発現も検出レベル以下であった。
図1. Tet-Onシステムの発現誘導原理
リバーステトラサイクリン制御性トランス活性化因子（rtTA）は、ドキシサイクリン（Dox）の存在下でテトラサイクリン応答因子（TRE）プロモーターに結合し目的遺伝子の発現を活性化する。Tet-On Cell LineはこのrtTAを安定的に発現する細胞株である（図は第1世代のTet-On Systemを示す）。
図2. HEK 293 Tet-On Advanced Cell Lineを用いたルシフェラーゼ遺伝子の発現誘導
HEK 293 Tet-On Advanced Cell LineにpTRE-Tight-luciferase vectorを導入し、Dox存在下と非存在下での発現を確認した。Dox存在下ではルシフェラーゼの高い発現が確認できるが、Dox非存在下では基底発現も検出レベル以下であった。
図3. 高いS/N比を示すTet-On 3G細胞株
各Tet-On 3G細胞株に応答ベクター（pTRE3G - Luc Vector: PTRE3Gプロモーター制御下でルシフェラーゼ遺伝子を発現）を一過性にトランスフェクションした。細胞をDox＋/－の状態で24時間培養しルシフェラーゼ活性を測定したところ、一過性のトランスフェクションであっても数千倍のS/N比を示した。
内容
Tet-On 3G Cell Line（製品コード 631195、631182、631183、631197）
- Tet-On 3G Cell Line
- Tet System Approved FBS（製品コード 631105）
保存
細胞：液体窒素*
FBS：－20℃
FBS：－20℃
| * | 到着後、ただちに液体窒素中で保存すること。 液体窒素保存ができない場合は、ただちに細胞を融解し、培養を行うこと。 |
関連製品・受託
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