TaKaRa Ex Taq^®

本製品は、LA PCRの原理を応用した3’→5’exonuclease活性（proof reading活性）を持つ耐熱性DNA Polymeraseである。通常のPCR条件下において、従来のTaq DNA Polymeraseと比べて、高い増幅効率、低いエラー率で高感度のPCRを実現できる。
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（250 U）

TaKaRa Ex Taq (Mg^2＋ plus Buffer)
（製品コード RR001A）

TaKaRa Ex Taq （5 U/μl）	250 U
10×Ex Taq Buffer （20 mM Mg2+ plus）	1 ml
dNTP Mixture （各2.5 mM）	800 μl

TaKaRa Ex Taq (Mg^2＋ free Buffer)
（製品コード RR01AM）

TaKaRa Ex Taq （5 U/μl）	250 U
10×Ex Taq Buffer （Mg2＋ free）	1 ml
MgCl2 （25 mM）	1 ml
dNTP Mixture （各2.5 mM）	800 μl

－20℃

濃度	各2.5 mM
形状	水溶液（ナトリウム塩）pH7～9
純度	各98％以上

* dATP、dCTP、dGTP、dTTPの等モル混合物で、希釈せずにそのままPCR反応に用いることができる。

活性化サケ精子DNAを鋳型／プライマーとして用い、下記の活性測定用反応液中にて74℃において、30分間に10 nmolの全ヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む活性を1 Uとする。

●25 Uの本酵素と1 μgのλ-Hind III分解物を74℃、16時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●25 Uの本酵素と1 μgのsupercoiled pBR322 DNAを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●25 Uの本酵素と1 μgのλDNAを74℃、16時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。

PCR法によるDNA増幅

TaKaRa Ex Taqを用いて増幅したPCR産物のほとんどは、3’末端にAが1塩基付加されている。したがって、そのPCR産物をそのままT-Vector［pMD20（製品コード 3270）、pMD19 (Simple)（製品コード 3271）など］にクローニングすることができる。また、末端平滑化およびリン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることも可能である。

性能試験結果については、各ロットのCertificate of Analysis（CoA）をご覧ください。CoAはhttps://catalog.takara-bio.co.jp/search/doc_index.phpからダウンロードできます。

TaKaRa Ex Taq （5 U/μl）	0.25 μl
10×Ex Taq Buffer*	5 μl
dNTP Mixture （各2.5 mM）	4 μl
Template	＜500 ng
Primer 1	0.2～1.0 μM（final conc.）
Primer 2	0.2～1.0 μM（final conc.）
滅菌精製水	up to 50 μl

* Mg^2＋ FreeのPCR Bufferの場合には、最適の濃度になるように添付MgCl₂を加える。

1 kb DNA を増幅する場合

98℃、10 sec 55℃、30 sec 72℃、1 min

30 cycles

または

98℃、10 sec 68℃、1 min

30 cycles

注意） 変性条件は、使用機種とチューブの種類にあわせて設定してください。
設定の目安は、98℃の場合は5～10 sec、94℃の場合は20～30 secです。

弊社では、さまざまな特長をもつPCR酵素を用意しています。
用途に応じて選択してください。

PCR Enzyme選択フローチャート

「タカラバイオ PCR Enzymes Guide」では、PCR酵素・関連製品とそのアプリケーションをご紹介しています。
下記よりPDFでご覧いただけます。

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