長鎖DNAもメチル化DNAもOK！高効率コンピテントセル
SOC培地添付
- ルーチンクローニングにも、長鎖DNA（10 kb以上）のクローニングにも最適！
- メチル化DNAのクローニングが可能
- cDNAライブラリーやゲノムライブラリーの作製にもおススメ
製品説明
コンピテントセルは、外来DNAを取り込む能力を持つ受容菌で、遺伝子組換え体プラスミドなどを取り込む。形質転換、形質導入などの際、効率良く確実に行えるコンピテントセルが必要となる。タカラバイオでは、Hanahanの方法に改良を加え、コンピテントセルを調製している。
E. coli HST08 Premiumは外来のメチル化DNAを切断する遺伝子群mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrAを欠失している。さらに、非常に高い形質転換能力を持っているため、メチル化されたDNAのクローニングから、遺伝子ライブラリーの作製、サブクローニング等に至るまで幅広い用途に使用できる。また、長鎖プラスミドDNAの形質転換においても高い効率が得られ、同様の遺伝子型を持つ他のコンピテントセルと比較してコロニー形成速度も速いため、TaKaRa DNA Ligation Kit LONG（製品コード 6024）との組み合わせにより10 kb以上のDNAのクローニング、ライブラリー作製を容易に行える。
pUC系プラスミドでの形質転換の際には、β-ガラクトシダーゼのα-相補性を利用し、X-Gal添加により組換え体の選別が容易となる。F－であるため、BAC、フォスミドベクターにも使用可能である。
※エレクトロポレーション用コンピテントセル（E. coli HST08 Premium Electro-Cells）も用意しています。
E. coli HST08 Premiumは外来のメチル化DNAを切断する遺伝子群mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrAを欠失している。さらに、非常に高い形質転換能力を持っているため、メチル化されたDNAのクローニングから、遺伝子ライブラリーの作製、サブクローニング等に至るまで幅広い用途に使用できる。また、長鎖プラスミドDNAの形質転換においても高い効率が得られ、同様の遺伝子型を持つ他のコンピテントセルと比較してコロニー形成速度も速いため、TaKaRa DNA Ligation Kit LONG（製品コード 6024）との組み合わせにより10 kb以上のDNAのクローニング、ライブラリー作製を容易に行える。
pUC系プラスミドでの形質転換の際には、β-ガラクトシダーゼのα-相補性を利用し、X-Gal添加により組換え体の選別が容易となる。F－であるため、BAC、フォスミドベクターにも使用可能である。
※エレクトロポレーション用コンピテントセル（E. coli HST08 Premium Electro-Cells）も用意しています。
内容
| E. coli HST08 Premium Competent Cells | 100 μl×10本 |
| pUC19 DNA (0.1 ng/μl) | 10 μl |
| SOC Medium* | 1 ml×10本 |
* SOC Mediumの組成 ：
【ご注意】| 2％ | Tryptone | |
| 0.5％ | Yeast extract | |
| 10 mM | NaCl | |
| 2.5 mM | KCl | |
| 10 mM | MgSO4 | |
| 10 mM | MgCl2 | |
| 20 mM | Glucose |
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。
保存
－80℃
品質
形質転換効率
プラスミドベクターを用いて形質転換する場合の方法により1 ngのpUC19プラスミドで形質転換し、Amp+のプレートでコロニーを選別した。
このとき、＞ 1×108 colonies/μg・pUC19プラスミドの効率を得た。
プラスミドベクターを用いて形質転換する場合の方法により1 ngのpUC19プラスミドで形質転換し、Amp+のプレートでコロニーを選別した。
このとき、＞ 1×108 colonies/μg・pUC19プラスミドの効率を得た。
Genotype
F－, endA1, supE44, thi-1, recA1, relA1, gyrA96, phoA, Φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF)U169, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC), ΔmcrA, λ－
（K-12株由来大腸菌）
Cell density
1～2×109 bacteria/ml
プラスミドスクリーニングに使用する抗生物質と選択濃度
| 抗生物質 | アンピシリン | カナマイシン | クロラムフェニコール | ストレプトマイシン | テトラサイクリン |
|---|---|---|---|---|---|
| 濃度（μg/ml） | 100 | 50 | 20 | 50 | 20 |
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- 注意事項
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