PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)

ゲノムDNA除去反応をプラス

ゲノムDNA除去反応をプラスしたリアルタイムRT-PCR専用逆転写キット
鋳型RNAをgDNA Eraserで処理するだけで効率よく残存ゲノムDNAを除去
除去反応はわずか2分、逆転写反応はもちろん15分で完了

製品コード	メーカー略称	製品名	容量	価格（税別）	特記事項	説明書、CoA データシートベクター情報	参考資料	カート
Takara Code	メーカー略称	製品名	容量	価格（税別）	特記事項	説明書、CoA データシートベクター情報	参考資料	カート
RR047A	TKR タカラバイオ（株）	PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)	100回（20 μl反応系）	￥47,000				個
RR047A	TKR タカラバイオ（株）		100回（20 μl反応系）	￥47,000				個
RR047B(A×4)	TKR タカラバイオ（株）	PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)	400回（20 μl反応系）	￥159,000				個
RR047B(A×4)	TKR タカラバイオ（株）		400回（20 μl反応系）	￥159,000				個
RR047Q	TKR タカラバイオ（株）	PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)	10回（20 μl反応系）		サンプルお申し込みはこちら			個
RR047Q	TKR タカラバイオ（株）		10回（20 μl反応系）		サンプルお申し込みはこちら			個

逆転写酵素PrimeScriptシリーズのご紹介

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製品説明

本製品は、ゲノムDNA除去反応をプラスしたリアルタイムRT-PCR専用の逆転写キットである。強力なDNA分解活性を有するgDNA EraserによりゲノムDNAのみを42℃ 2分の処理で除去した後、DNA分解活性を完全に抑制する成分を含む逆転写用反応試薬を添加し、15分間逆転写反応を行う。20分未満の迅速な反応で、ロスのないRNAからのcDNA合成が達成できる。
本製品を用いて得られたcDNAは、インターカレーター法、プローブ検出法のリアルタイムPCRアッセイのどちらにも利用できる。目的に応じてTB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR820S/A/B）やTB Green Premix Ex taq (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR420S/A/B）、Probe qPCR Mix（製品コード RR391A/B）などの定量PCR試薬と組み合わせて2ステップリアルタイムRT-PCRを行う。

内容

（20 μl反応系、100回）

1.	gDNA Eraser	100 μl
2.	5×gDNA Eraser Buffer ^*1	200 μl
3.	PrimeScript RT Enzyme Mix I ^*2	100 μl
4.	5×PrimeScript Buffer 2 (for Real Time) ^*3	400 μl
5.	RT Primer Mix ^*4	400 μl
6.	RNase Free dH₂O	1 ml×2本
7.	EASY Dilution (for Real Time PCR) ^*5	1 ml

*1 5×gDNA Eraser Buffer成分がその後の逆転写反応に必要なため、ゲノムDNA除去反応は必ず行ってください。

*2 RNase inhibitorを含む。

*3 dNTP mixtureを含む。

*4 Oligo dT PrimerとRandom 6 mersを含む。

*5 total RNAやcDNAを段階希釈するための希釈溶液として使用する。水やTEで希釈すると正確な希釈ができない場合があるが、EASY Dilution (for Real Time PCR)を用いると低濃度までの正確な希釈ができ、幅広いレンジで検量線の作成ができる。なお、このバッファーが逆転写やPCRの反応性に影響をおよぼすことはない。希釈した鋳型溶液はそのまま逆転写反応やPCR反応の鋳型として使用できる。
単品でも購入できる。EASY Dilution (for Real Time PCR)（製品コード 9160）

【注】

EASY DilutionはタカラバイオのリアルタイムPCR試薬と組み合わせてご使用ください。他社メーカーの製品については適合性を確認していません。
核酸希釈液は用時調製を行い、当日中にご使用ください。

保存

－20℃

キット以外に必要な試薬、機器（主なもの）

サーマルサイクラー
（または37℃、42℃恒温槽、85℃ヒートブロック）
0.2 mlおよび1.5 mlマイクロチューブ（逆転写反応用）
マイクロピペットおよびチップ（オートクレーブ処理したもの）

特長

ゲノムDNAの除去をgDNA Eraserによるわずか2分の反応で実現する。
15分の反応で効率良くリアルタイムPCR 用の鋳型cDNAを合成できる。2ステップのリアルタイムRT-PCRに最適である。
逆転写用のプライマーとしてRandom 6 mersとOligo dT Primerを混合したRT Primer Mixを使用しており、RNAの全領域を均一に合成できる。
インターカレーター法TB Greenアッセイ用、ならびにプローブアッセイ用のプロトコールを用意している。リアルタイムPCR時のアッセイ方法にあわせて選択する。
リアルタイムRT-PCRによる定量には検量線の作成が必須である。適切な検量線の作成には、total RNAや逆転写後のcDNAを低濃度まで正確に希釈することが重要だが、水やTEで希釈すると特に低濃度の希釈が不安定となり、利用できる検量線のレンジが狭くなる場合がある。製品添付のEASY Dilution (for Real Time PCR) を希釈に用いることで低濃度まで正確に希釈でき、幅広いレンジで検量線の作成を行うことができる。

注意

本製品を用いて調製したcDNA溶液を鋳型としてTB Greenアッセイを行う場合は
　　TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR820S/A/B）
　　TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR420S/A/B）
などのTB Green Premixシリーズの使用をお勧めします。本製品と組み合わせて使用することにより、信頼性の高い結果を得ることができます。
TB Green Fast qPCR Mix（製品コード RR430A/B）との組み合わせは反応不良となる場合がありますのでお勧めしません。

技術情報

Protocols

逆転写反応：TB Geen™ Assay（インターカレーター法）の場合
 逆転写反応：Probe Assayの場合

Application

total RNA中の混入ゲノムDNA処理能力の検証（1）
total RNA中の混入ゲノムDNA処理能力の検証（2）
cDNA合成効率の比較（1）
cDNA合成効率の比較（2）

使用文献・参考文献

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注意事項

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PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)

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内容

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キット以外に必要な試薬、機器（主なもの）

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