NucleoSpin^® Tissue

本製品は、動物組織、培養細胞、バクテリア、酵母などから高純度ゲノムDNAを迅速に精製するためのキットである。35 μgまでの高純度ゲノムDNAが調製可能である。
サンプルの溶解は、SDSとProteinase Kを含む溶液中で56℃で行う。NucleoSpin Tissue Columnのシリカ膜へのDNAの結合を最適化するため、溶解液に大量のカオトロピック塩とエタノールを加える。シリカ膜への結合は可逆的で核酸に特異的であるため、不純物は洗浄バッファーにより効果的に除かれる。高純度のゲノムDNAは最終的に低イオン強度、弱アルカリ性のElution Bufferにより溶出され、PCRやサザンブロッティング、酵素反応など次の実験に直接使用することができる。

原理	シリカメンブレン法
形状	ミニスピンカラム
サンプル量	～25 mg 組織、102～107個 培養細胞
精製サイズ	200 bp～約50 kb
回収量	20～35 μg
A260/280	1.7～1.9
溶出液量	60～100 μl
精製時間	～20分（溶解後）
結合容量	60 μg

・NucleoSpin Tissue Columns
・Collection Tubes (2 ml)
・Lysis Buffer T1
・Buffer B3^*
・Wash Buffer BW
・Wash Buffer B5 (Concentrate)
・Elution Buffer BE^**
・Proteinase K（lyophilized）
・Proteinase Buffer PB

* 従来は、Buffer B1、Buffer B2を混合してBuffer B3を調製していましたが、Lot.1211/***よりBuffer B3（調製済）が含まれています。
** 組成：5 mM Tris-HCl, pH 8.5

室温

試薬
・96～100%エタノール

器具
・1.5 mlマイクロチューブ
・ピペットチップ（滅菌済）
・ピペット
・微量高速遠心機
・ボルテックスミキサー
・ヒートブロック
・サンプル破砕用ホモジェナイザー

NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。