NucleoBond^® Xtra Midi/Maxi EF

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NucleoBond Xtra EFシリーズは、エンドトキシンフリーのプラスミドDNAを精製するための高速オープンカラムである。高純度プラスミドDNAを高収量（Midi：～500 μg、Maxi：～1000 μg）、短時間で精製できる。精製DNAのエンドトキシン濃度は0.05 EU/μg DNA以下にまで低減されるため、高純度DNAが要求される細胞へのトランスフェクション実験にも使用できる。

	NucleoBond Xtra Midi EF		NucleoBond Xtra Maxi EF
原理	陰イオン交換クロマトグラフィー法
形状	自然落下型カラム
推奨する 大腸菌培養液量	＜200 ml（高コピー） ＜400 ml（低コピー）		＜600 ml（高コピー） ＜1,200 ml（低コピー）
プラスミドDNAサイズ	＜300 kb
回収量	～500 μg		～1,000 μg
A260/280	1.80～1.95
エンドトキシンレベル	＜0.05 EU/μg DNA
イソプロパノール沈殿時の回収方法	Xtra Midi EF	Xtra Midi Plus EF	Xtra Maxi EF	Xtra Maxi Plus EF
	遠心分離	NucleoBond Finalizer	遠心分離	NucleoBond Finalizer
精製時間	85分	45分	90分	50分

【注】低コピープラスミドの精製には使用するバッファー量を増やす必要があるため、追加バッファー［NucleoBond Xtra EF Buffer Set I（製品コード 740427）］が必要である。低コピープラスミドの精製のみに本製品を使用する場合に必要なNucleoBond Xtra EF Buffer Set Iの数を以下に示す。

製品名	製品コード	容量	NucleoBond Xtra EF Buffer Set I 追加セット数
NucleoBond Xtra Midi EF	740420.10	10回	1セット
NucleoBond Xtra Midi EF	740420.50	50回	2セット
NucleoBond Xtra Midi plus EF	740422.10	10回	1セット
NucleoBond Xtra Midi plus EF	740422.50	50回	2セット
NucleoBond Xtra Maxi EF	740424.10	10回	1セット
NucleoBond Xtra Maxi EF	740424.50	50回	3セット
NucleoBond Xtra Maxi plus EF	740426.10	10回	1セット
NucleoBond Xtra Maxi plus EF	740426.50	50回	3セット

LyseControlは青い色素を含んだpH indicator試薬であり、Buffer LYS-EFにあらかじめ含まれている。懸濁大腸菌液（A）にBuffer LYS-EFを添加すると同時に、菌懸濁液は青く変化する（B）。懸濁液を中和するBuffer NEU-EFの添加と同時に、LyseControlは無色に変化する（C）。ここで中和が不充分な場合、青色が残った状態になる（D）。中和反応が十分な場合、完全に無色になる（E）。LyseControlにより、完全なアルカリ溶解・中和を確認することができ、最適な結果を得ることができる。（Buffer LYS-EFへのLyseControlの添加は、Lot.1403/***以降です。）

A		大腸菌ペレットをBuffer RES-EFにより懸濁
B		Buffer LYS-EF（LyseControlを含む）を添加。 菌懸濁液が青く変色。
C		Buffer NEU-EFを添加して、混合開始。 中和反応によりLyseControlの青色が変化し始める。
D		LyseControlの青色が若干残っている状態。 －混合が不十分
E		LyseControlが無色の状態 －混合が十分に行われている。

NucleoBond Xtra Midi EF、NucleoBond Xtra Maxi EF
・Buffer RES-EF
・Buffer LYS-EF
・Buffer NEU-EF
・Buffer EQU-EF
・Buffer FIL-EF
・Buffer ENDO-EF
・Buffer WASH-EF
・Buffer ELU-EF
・Buffer TE-EF
・H₂O-EF（再溶解用）
・H₂O-EF（70%エタノール用）
・RNase A（凍結乾燥品）
・NucleoBond Xtra Midi ColumnsまたはNucleoBond Xtra Maxi Columns
・Plastic Washers

NucleoBond Xtra Midi plus EF、NucleoBond Xtra Maxi plus EFには上記に加えて下記の物が付属する。
・NucleoBond Finalizers
・30 ml Syringes
・1 ml Syringes

NucleoBond Xtra EF Buffer Set I

・Buffer RES-EF	150 ml
・Buffer LYS-EF	150 ml
・Buffer NEU-EF	150 ml
・RNase A（凍結乾燥品）	10 mg

・イソプロパノール
・70％エタノール

室温
（RNase Aを添加したBuffer RES-EFは4℃で保存する。6ヵ月間安定）
※Buffer LYS-EFにはSDSが含まれているため、20℃以下で保存すると、沈殿が生じることがある。
沈殿が生じた場合は、30～40℃で数分間、ボトルを保温し、混合して溶解した後に使用する。

NucleoBondはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。