DNA Blunting Kit

本製品は、T4 DNA Polymeraseの5’→3’polymerase活性と3’→5’exonuclease活性を利用してDNAの末端を平滑化することにより、突出末端のDNAでも簡単に平滑末端のベクターにライゲーションできるシステムである。
DNAが5’突出末端の場合は、5’→3’polymerase活性により3’陥没部分に塩基が付加され、5’陥没末端の場合は3’→5’exonuclease活性により3’突出部分が削られて、平滑末端になる。この末端平滑化反応は同時に起こるので、末端形状が不明のDNAでも簡単に平滑化することができる。末端平滑化されたDNAは、タカラバイオ独自のライゲーションシステムにより、効率よく平滑末端のベクター等にライゲーションでき、PCR増幅後のDNAやクローニングに不都合な末端形状を持ったインサートDNAを、平滑末端ベクターにライゲーションする際に、特に有効である。
本製品は突出末端のベクターを平滑末端のベクターに変更する場合にも有効である。平滑化したベクターはAlkaline Phosphatase（製品コード 2120A/B, 2250A/B）で脱リン酸化して使用する。

（20回分）

T4 DNA Polymerase	20 μl
10×Buffer（dNTPを含む）	30 μl
DNA Dilution Buffer	500 μl
Ligation Solution A*	600 μl×2
Ligation Solution B*	150 μl

* Ligation Solution A, Bは、DNA Ligation Kit Ver.1（製品コード 6021）に含まれる試薬と同じものである。

－20℃

DNA末端平滑化の原理

 

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