WEB会員ログインが必要です
Capturem His-Tagged Purificationシリーズは次世代メンブレン技術を用いてヒスチジンタグ(Hisタグ)融合タンパク質を精製できる革新的なキットで、従来の金属レジンの使用範囲を超えた幅広い条件に適用できる。サンプルとしてバクテリアと哺乳類細胞ライセートの両方が使用でき、変性条件下(8 M尿素、6 Mグアニジン塩酸塩)での使用も可能である。また、EDTA、還元剤(βメルカプトエタノール、DTT、TCEPなど)、グリセロールなどの添加剤を含む幅広い条件下でも優れた性能を発揮する。タンパク質のタンデムアフィニティー精製にも使用可能である。
本シリーズは、高性能ナイロンメンブレンを用いており、細胞溶解液の添加から溶出までの室温操作が可能で処理時間が短いためタンパク質の劣化や失活の懸念が少なく、待ち時間のない手軽な操作で質の高い精製が可能である。
化学的修飾により孔の表面積を拡大したナイロンメンブレンは、ベッドボリュームが少なく(2 μl:Miniprepの場合)、Hisタグ融合タンパク質の結合能が高く(≧75 mg/cm3)、高純度、高濃度での精製が可能である。ラインナップはMiniprep、Maxiprep、24 well、96 well、Large Volumeの4種類があり、各製品の詳細は下記に記した。
Miniprep Kit | Maxiprep Kit | 24 well plate | 96 well plate | Large Volume | |
---|---|---|---|---|---|
Miniprep Column |
Maxiprep Column |
24 Well Plate |
96 Well Plate |
Large Volume Unit |
|
サンプル容量 | ~800 μl | ~25 ml | ~4 ml | ~1,000 μl | 150~500 ml |
回 数 | 20回 | 6回 | 24 well | 96 well | 4回 |
所要時間 | 5分 | 15分 | 15分 | 15分 | 15~30分 |
最大収量* | 80 μg | 1.5 mg | 800 μg | 80 μg | 10~25 mg |
遠心条件 | 11,000×g 1分 | 2,000×g 3分 | 600×g 2分 | 2,000×g 3分 | × |
吸引濾過 | × | × | ○ | ○ | ○ |
Buffer添付 | あり | あり | なし | なし | なし |
※ サンプルのタイプ、種類、抗体アイソタイプによって異なります。
Buffer | 組成 |
---|---|
Lysis Buffer | xTractor Buffer(製品コード 635625)を推奨。他のスタンダートなlysis bufferも使用可能。 |
Wash Buffer | 150 mM NaCl, 20 mM Na3PO4, pH7.6 |
Elution Buffer | 500 mM NaCl, 20 mM Na3PO4, 500 mM imidazole, pH7.6 |
添加剤 | 濃度 |
---|---|
MOPS | 200 mM |
HEPES | 200 mM |
Tris | 200 mM |
EDTA | 10 mM |
β-mercaptoethanol | 30 mM |
DTT | 10 mM |
TCEP | 5 mM |
Guanidine-HCl | 6 M |
Urea | 8 M |
Nonionic detergent (Triton X-100) | 2% |
Nonionic detergent (Tween 20) | 2% |
Anionic detergent (SDS) | 1% |
Arginine | 500 mM |
Glycine | 100 mM |
Histidine | 20 mM |
Sodium chloride | 2 M |
Imidazole | 40 mM |
Glycerol | 10% |
Capturem His-Tagged Purification Miniprep Column | 20本 |
xTractor Buffer | 15 ml×2 |
Wash Buffer | 10 ml |
Elution Buffer | 10 ml |
Capturem His-Tagged Purification Maxiprep Column | 6本 |
Capturem Maxiprep Filters | 6本 |
xTractor Buffer | 200 ml |
Wash Buffer | 40 ml |
Elution Buffer | 15 ml |