プライマーがあればすぐ利用できるキャリーオーバー対策PCRキット

TaKaRa Taq™ HS PCR Kit, UNG plus

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR R013S R013S TaKaRa Taq™ HS PCR Kit, UNG plus
  • PCR酵素
50回 ¥20,000
¥16,000
2017/11/27~
2018/02/28

説明書・データシート・ベクター情報
TKR R013A R013A TaKaRa Taq™ HS PCR Kit, UNG plus
  • PCR酵素
200回 ¥63,800
¥51,040
2017/11/27~
2018/02/28

説明書・データシート・ベクター情報

※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。

製品説明

エンドポイントPCRにおいて、特に食品・環境検査など同じPCR反応を繰り返し行う場合に、キャリーオーバーによる偽陽性が生じる危険性が高い。本製品は、継続的に使用することにより、このようなキャリーオーバーによる偽陽性を防止するための製品である。
本製品では、dTTPの代わりにdUTPを基質として用いて、ホットスタートPCR酵素TaKaRa Taq HSによる増幅を行う。PCR反応液調製後、ウラシルを含むDNAを分解する酵素であるUNG(Uracil - N - glycosylase)を作用させると、ウラシルを含む前段階におけるPCR産物はUNGにより分解されるが、あらたに加えられた鋳型は分解されないため、キャリーオーバーの影響を受けずにPCR増幅を行うことができる。
パンフレットもご覧ください。

UNGによる分解

UNGによる分解は次のように起こる。PCR前の25℃、10分の反応で、PCR反応液に混入しているウラシルを含むPCR産物のデオキシリボースとウラシル塩基の間のN- グリコシド結合がUNGにより加水分解され、脱ピリミジン部位が生じる。続いて95℃、2分の熱処理により、UNGが失活すると同時に混入DNA断片は脱塩基部位でリン酸バックボーンの加水分解により、切断、分解される。UNGは、一本鎖と二本鎖のウラシルを含むDNAを加水分解するが、RNAに対しては作用しない。

内容

R013S(50回分、PCR 50 μl反応系)
1.TaKaRa Taq HS(5 U/μl)12.5 μl
2.10×PCR Buffer for UNG plus*1(10×)250 μl
3.dU plus dNTP Mixture*2(12.5×)200 μl
4.UNG(2 U/μl)25 μl

R013A(200回分、PCR 50 μl反応系)
1.TaKaRa Taq HS(5 U/μl)50 μl
2.10×PCR Buffer for UNG plus*1(10×)1 ml
3.dU plus dNTP Mixture*2(12.5×)800 μl
4.UNG(2 U/μl)100 μl
*1Mg2+濃度:22.5 mM(10×)
本製品は、dUTP がdTTPの3倍濃度に設定されているため、全体的にdNTP濃度が高くなる。MgCl2とdNTPの量のバランスを保つため、通常のTaKaRa Taq Hot Start Version(製品コード R007A)に添付の10×PCR Buffer(Mg2+ plus)よりMg2+濃度が高くなっている。
*2dU plus dNTP Mixture:以下の組成の水溶液(ナトリウム塩)である。
dUTP 7.5 mM
dATP 2.5 mM
dGTP 2.5 mM
dCTP 2.5 mM

保存

-20℃

  遺伝子検出・検査 関連試薬の選択フローをご利用ください

分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

「検査(PCR/ELISA)」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。

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