ウシ白血病ウイルス検出キット

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  • 世界的に用いられている配列の保存安定性が高いpol遺伝子領域をターゲットとしてプロウイルスとして組み込まれたウシ白血病ウイルス(BLV)遺伝子を検出
  • BLV遺伝子とウシゲノムRPPH1遺伝子を1チューブで同時に検出
    PCR阻害の有無やDNAの入れ忘れ等による偽陰性を確認可能
  • RPPH1遺伝子に対するBLV遺伝子の相対定量(BLV感染率算出)が可能
  • 検査に必要なコンポーネントを全て含んだオールインワンキット
ウシ白血病ウイルス検出キット
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
RC201A

TKR

タカラバイオ(株)
ウシ白血病ウイルス検出キット
ライセンス
50回 ¥48,000
説明書・データシート・ベクター情報
RC201A
RC202A

TKR

タカラバイオ(株)
ウシ白血病ウイルス検出キット(with ROX Reference Dye)
ライセンス
50回 ¥48,000
説明書・データシート・ベクター情報
RC202A
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製品説明

ウシ白血病ウイルス(bovine leukemia virus;BLV)は、血液や乳汁中のリンパ球等のDNAにプロウイルスとして組み込まれるレトロウイルスである。
本製品は、プロウイルスとして組み込まれたウシ白血病ウイルス(BLV)の逆転写酵素遺伝子であるpol 遺伝子をターゲットとして、リアルタイムPCRによりBLV遺伝子を検出するためのキットである。また、BLV遺伝子と共にウシゲノムDNAをマルチプレックスPCRで同時に検出(および定量)することが可能である。

本キットは、岩手大学農学部共同獣医学科 村上賢二教授の研究成果に基づき、弊社と同大学との共同研究によって開発されました。

(注意)ウシ白血病ウイルス検出キット(製品コード RC201A)は、タカラバイオ装置用です。
ウシ白血病ウイルス検出キット(with ROX Reference Dye)(製品コード RC202A)は、Applied BiosystemsのリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置用です。

ウシゲノムRPPH1遺伝子に対するBLV遺伝子の相対定量(BLV感染率算出)
プローブ法によるマルチプレックスPCRで、 BLV (pol)遺伝子とウシゲノムDNAを1チューブで検出し、BLV遺伝子をウシゲノムDNAに対する相対量として算出可能 ウシゲノムRPPH1遺伝子に対するBLV遺伝子の相対定量(BLV感染率算出)

検査フロー

相対定量を行う場合は事前にDNA濃度を測定する必要はない。
1反応あたり400 ng程度までは鋳型として添加可能であることを確認している。
検査フロー

【実験例】

  • Positive Control DNAを用いた検量線の作成
    本キットに含まれるPositive Controlからそれぞれ調製した段階希釈液を用いて検量線を作成した。
    BLV遺伝子、ウシゲノムDNAともに10~1×106 copiesの範囲で精度よく検量線が作成できた。
    BLV検出系(FAM)
    BLV検出系(FAM)
    ウシゲノムDNA検出系(ROX)
    ウシゲノムDNA検出系(ROX)

  • BLV陽性検体での確認
    BLV陽性の50検体について、本キットを用いて検査を行ったところ、50検体すべてで陽性と判定された。
    BLV(pol)検出系(FAM)
    BLV(pol)検出系(FAM)
    ウシゲノムDNA検出系(HEX)
    ウシゲノムDNA検出系(HEX)
    (Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR Systems(Thermo Fisher Scientific社)利用)

内容

ウシ白血病ウイルス検出キット(製品コード RC201A)
横にスクロールできます
Probe qPCR Mix-UNG (2×)625 μl
Primer/Probe Mix (BLV) (5×)250 μl
H2O1 ml
Positive Control DNA(2×105 copies/μl)100 μl
PC Dilution Buffer1 ml

ウシ白血病ウイルス検出キット(with ROX Reference Dye)(製品コード RC202A)
横にスクロールできます
Probe qPCR Mix-UNG (2×)625 μl
Primer/Probe Mix (BLV) (5×)250 μl
H2O1 ml
Positive Control DNA(2×105 copies/μl)100 μl
PC Dilution Buffer1 ml
ROX Reference Dye I30 μl
ROX Reference Dye II30 μl
蛍光標識プローブ、試薬を含んでいるため、遮光に留意すること。

Reference補正が必要なリアルタイムPCR装置には、製品コード RC202Aをご使用ください。

保存

-20℃

キット以外に必要な機器、器具(主なもの)

【機器】
  • 微量高速遠心機
  • ヒートブロック
  • リアルタイムPCR装置
     ウシ白血病ウイルス検出キット(製品コード RC201A)の場合
     Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC(製品コード TP970)
     Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900/TP960:終売)
     Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700/TP760)

     ウシ白血病ウイルス検出キット(with ROX Reference Dye)(製品コード RC202A)の場合
     Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
     StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
【器具】
  • 200 μl、20 μl、10 μl 各マイクロピペット
  • マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
  • 0.1 ml 8-strip -neo- tube & cap Set(製品コード NJ907)
【その他】
横にスクロールできます

補足資料

Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意している。
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用する。
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ操作マニュアル ―ウシ白血病ウイルス検出キット(製品コードRC201A)専用―

Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System、StepOnePlus Real-Time PCR Systemを使用する場合のQuick Manualはこちら
操作マニュアル -ウシ白血病ウイルス検出キット(with ROX Reference Dye)(製品コード RC202A)専用-
注意事項
  • 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
  • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
  • タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
    また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。
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