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- 世界的に用いられている配列の保存安定性が高いpol遺伝子領域をターゲットとしてプロウイルスとして組み込まれた牛伝染性リンパ腫ウイルス遺伝子を検出
- BLV遺伝子とウシゲノムRPPH1遺伝子を1チューブで同時に検出
PCR阻害の有無やDNAの入れ忘れ等による偽陰性を確認可能 - RPPH1遺伝子に対するBLV遺伝子の相対定量（BLV感染率算出）が可能
- 検査に必要なコンポーネントを全て含んだオールインワンキット
「ウシ白血病ウイルス検出キット」および「ウシ白血病ウイルス検出キット(with ROX Reference Dye)」につきまして、それぞれ名称を「Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit」および「Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit (with ROX Reference Dye)」に変更します。
取扱説明書や製品パッケージなどの製品名表記は、2023年8月以降順次変更を予定しています。
変更の詳細はこちら
取扱説明書や製品パッケージなどの製品名表記は、2023年8月以降順次変更を予定しています。
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製品説明
牛伝染性リンパ腫ウイルス(bovine leukemia virus；BLV)は、血液や乳汁中のリンパ球等のDNAにプロウイルスとして組み込まれるレトロウイルスです（疾病「牛白血病」の呼称は「牛伝染性リンパ腫」に変更されました）。
本製品は、プロウイルスとして組み込まれたBLVの逆転写酵素遺伝子であるpol 遺伝子をターゲットとして、リアルタイムPCRによりBLV遺伝子を検出するためのキットです。また、BLV遺伝子と共にウシゲノムDNAをマルチプレックスPCRで同時に検出（および定量）することが可能です。
本製品は、岩手大学農学部共同獣医学科 村上賢二教授の研究成果に基づき、弊社と同大学との共同研究によって開発されました。
※2022年12月出荷分より製品仕様を一部変更しました。キットに含まれるコンポーネント、Primer/Probe Mix およびPositive Control DNAの改良に伴い、コンポーネント名の一部を変更しました。
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ウシゲノムRPPH1遺伝子に対するBLV遺伝子の相対定量（BLV感染率算出）
プローブ法によるマルチプレックスPCRで、 BLV (pol)遺伝子とウシゲノムDNAを1チューブで検出し、BLV遺伝子をウシゲノムDNAに対する相対量として算出可能
【検出対象遺伝子】
Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit（製品コード RC201A）
Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit (with ROX Reference Dye)（製品コード RC202A）
本製品は、プロウイルスとして組み込まれたBLVの逆転写酵素遺伝子であるpol 遺伝子をターゲットとして、リアルタイムPCRによりBLV遺伝子を検出するためのキットです。また、BLV遺伝子と共にウシゲノムDNAをマルチプレックスPCRで同時に検出（および定量）することが可能です。
本製品は、岩手大学農学部共同獣医学科 村上賢二教授の研究成果に基づき、弊社と同大学との共同研究によって開発されました。
※2022年12月出荷分より製品仕様を一部変更しました。キットに含まれるコンポーネント、Primer/Probe Mix およびPositive Control DNAの改良に伴い、コンポーネント名の一部を変更しました。
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ウシゲノムRPPH1遺伝子に対するBLV遺伝子の相対定量（BLV感染率算出）
プローブ法によるマルチプレックスPCRで、 BLV (pol)遺伝子とウシゲノムDNAを1チューブで検出し、BLV遺伝子をウシゲノムDNAに対する相対量として算出可能
【検出対象遺伝子】
Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit（製品コード RC201A）
| 検出対象遺伝子 | プローブ標識 |
| pol遺伝子 | FAM（レポーター）／ダーククエンチャー |
| RPPH1遺伝子 | ROX（レポーター）／ダーククエンチャー |
Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit (with ROX Reference Dye)（製品コード RC202A）
| 検出対象遺伝子 | プローブ標識 |
| pol遺伝子 | FAM（レポーター）／ダーククエンチャー |
| RPPH1遺伝子 | HEX（レポーター）／ダーククエンチャー |
| （Reference Dye） | （ROX） |
検査フロー
相対定量を行う場合は事前にDNA濃度を測定する必要はない。
1反応あたり400 ng程度までは鋳型として添加可能であることを確認しています。
1反応あたり400 ng程度までは鋳型として添加可能であることを確認しています。
【実験例】
- Positive Control DNAを用いた検量線の作成
本キットに含まれるPositive Controlからそれぞれ調製した段階希釈液を用いて検量線を作成しました。
BLV遺伝子、ウシゲノムDNAともに10～1×106 copiesの範囲で精度よく検量線が作成できました。（Thermal Cycler Dice Real Time System III 使用）BLV検出系（FAM）
ウシゲノムDNA検出系（ROX）
- BLV陽性検体での確認
BLV陽性の75検体について、本キットを用いて検査を行ったところ、75検体すべてで陽性と判定されました。（Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR Systems（Thermo Fisher Scientific社）利用）BLV(pol)検出系（FAM）
ウシゲノムDNA検出系（HEX）
内容
- Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit（製品コード RC201A）
-
Probe qPCR Mix-UNG (2×) 625 μl Primer/Probe Mix 3 (BLV) (5×)＊ 250 μl 
H2O1 ml Positive Control DNA 2 (2×105 copies/μl) 100 μl PC Dilution Buffer 1 ml - Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit (with ROX Reference Dye)（製品コード RC202A）
-
＊ 蛍光標識プローブ、試薬を含んでいるため、遮光に留意してください。
Probe qPCR Mix-UNG (2×) 625 μl Primer/Probe Mix 4 (BLV) (5×)＊ 250 μl H2O 1 ml Positive Control DNA 2 (2×105 copies/μl) 100 μl PC Dilution Buffer 1 ml ROX Reference Dye I＊ 30 μl ROX Reference Dye II＊ 30 μl
Reference補正が必要なリアルタイムPCR装置には、製品コード RC202Aをご使用ください。
保存
－20℃
本製品以外に必要な機器、器具（主なもの）
- 【機器】
-
- 微量高速遠心機
- ヒートブロック
- リアルタイムPCR装置
Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit（製品コード RC201A）の場合
Thermal Cycler Dice Real Time System IV with PC（製品コード TP1010）
Thermal Cycler Dice Real Time System III（製品コード TP950/TP970/TP980/TP990）
Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
LightCycler 96 System/LightCycler 480 System II（Roche Diagnostics 社）
CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System（BIO-RAD 社）等
Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit (with ROX Reference Dye)（製品コード RC202A）の場合
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
QuantStudio 5 Real-Time PCR System (96-well, 0.2 ml block)（Thermo Fisher Scientific 社）
StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）
- 【器具】
-
- 200 μl、20 μl、10 μl 各マイクロピペット
- マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
- 0.1 ml 8-strip -neo- tube & cap Set（製品コード NJ907）
- 【その他】
補足資料
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意しています。
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用してください。
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ操作マニュアル―Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit（製品コードRC201A）専用―
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System、StepOnePlus Real-Time PCR Systemを使用する場合のQuick Manualはこちら
操作マニュアル―Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit (with ROX Reference Dye)（製品コード RC202A）専用―
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用してください。
Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ操作マニュアル―Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit（製品コードRC201A）専用―
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System、StepOnePlus Real-Time PCR Systemを使用する場合のQuick Manualはこちら
操作マニュアル―Bovine Leukemia Virus qPCR Detection Kit (with ROX Reference Dye)（製品コード RC202A）専用―
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
- タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
- タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。 - ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。
