製品説明
本製品は、検出にプローブを用いる1ステップリアルタイムRT-PCR専用のキットです。RT-PCRを1チューブ内で連続的に行えるため、操作が簡便でコンタミネーションの心配がありません。また、増幅産物をリアルタイムに検出でき、PCR後に電気泳動などで確認する必要がありません。RNAウイルスなど微量RNAの検出に最適です。
反応には伸長性に優れ、短時間の反応で効率よくcDNA合成が可能なPrimeScript RTaseとPCR酵素として定評のある
TaKaRa Ex Taq HSを用い、反応系を1ステップRT-PCR用に至適化しています。反応特異性、増幅効率が高く、安定した1ステップリアルタイムRT-PCRを行うことができます。
なお、本製品はThermal Cycler Dice Real Time Systemに最適化していますが以下のリアルタイムPCR装置でも使用例があります。
(詳しくは弊社までお問い合わせください。)
- Thermal Cycler Dice Real Time System III (製品コード TP950/TP970/TP980/TP990)
- Thermal Cycler Dice Real Time System II (製品コード TP900/TP960:終売)
- Thermal Cycler Dice Real Time System Lite (製品コード TP700/TP760:終売)
- CronoSTAR 96 Real-Time PCR System(製品コード 640231/640232)
- CronoSTAR Portable Real-Time PCR System(製品コード 640245/640247/640249:終売)
- Applied Biosystems 7300/7500 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific社)
- LightCycler (Roche Diagnostics社)
など
注:インターカレーター(TB Green)を用いる1ステップリアルタイムRT-PCRには、One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)(製品コード RR086A)、またはOne Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(製品コード RR066A)をご使用ください。
内容
(100回分、50 μl反応系)
2×One Step RT-PCR Buffer III*1 | 840 μl×3 |
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) | 100 μl |
PrimeScript RT enzyme Mix II*2 | 100 μl |
RNase Free dH2O | 1.25 ml×2 |
ROX Reference Dye (50×conc.)*3 | 100 μl |
ROX Reference Dye II (50×conc.)*3 | 100 μl |
*1 dNTP Mixture、Mg
2+を含む。
*2 RNase Inhibitorを含む。
- ROX Reference Dye を添加する機種
・Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
- ROX Reference Dye II を添加する機種
・Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
- 添加の必要がない機種
・Thermal Cycler Dice Real Time System シリーズ(製品コード TP950/TP970/TP980/TP990、TP900/TP960/TP700/TP760:終売)
・CronoSTAR 96 Real-Time PCR System(製品コード 640231/640232)
・CronoSTAR Portable Real-Time PCR System(製品コード 640245/640247/640249)
・LightCycler(Roche Diagnostics社)
保存
-20℃
本製品以外に必要な試薬、器具、機器(主なもの)
- リアルタイムPCR装置
- 専用反応チューブあるいはプレート
- PCR用プライマー
- 検出用プローブ(Perfect Real Time サポートシステム for プローブやTaKaRa qPCR Probeなど)
- マイクロピペットおよびチップ(オートクレーブ処理したもの)
使用上の注意
本製品による逆転写反応には、PCR用のSpecific Primer (Reverse) を用います。Random PrimerやOligo dT Primerは使用できません。
特長
- One Step RT-PCRによりRNAウイルスなど微量RNAの解析を迅速かつ正確に行うことが可能です。
- PCRには、Hot Start用酵素TaKaRa Ex Taq HSを用いています。バッファー系は、リアルタイムPCR用に至適化されているため、増幅効率が良く、高感度な検出ができます。また、バッファーは、2×濃度のプレミックスなので、反応液の調製が簡単です。
Perfect Real Timeサポートシステム for プローブは、プローブ法によるリアルタイムRT-PCR用に最適化されたプライマー・プローブのセットを検索・オンライン注文するためのシステムです。
ヒト、マウス、ラットのRefSeq登録遺伝子に対して網羅的にリアルタイムRT-PCR用のプライマー・プローブを設計しています。
ターゲット遺伝子を検索し、ご希望のプライマーとプローブのセットを選択すれば簡単にオンラインで注文できます。
わずらわしいプライマー・プローブ設計と反応条件の至適化作業はもう不要です。siRNAの効果の確認、DNAマイクロアレイ解析結果の検証など遺伝子発現定量や遺伝子検出にどうぞお気軽にご利用ください。
サポートシステムはこちら
ご希望の配列でプライマー・プローブ(またはプローブ単品)の合成のみを行いたい場合や、サポートシステムで対応していない生物種に対してプライマーおよびプローブの設計をご希望の場合は、TaKaRa qPCR Probeをご利用ください。
TaKaRa qPCR Probeについてはこちら