Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCR

※LC EMA-qPCR法は、「迅速性」に加えて「生菌選択性」を併せ持つ、新しい遺伝子検査法です。

Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCRは、LC EMA-qPCRを行う際に用いるレジオネラ属菌用に至適化されたEMA処理用キットであり、EMA処理に必要な試薬が含まれている。検水を濃縮し、Legionella LC Medium Base Ver.2（製品コード 9017）にサプリメントを加えた培地を用いて液体培養を行った後、Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCRを用いてEMA処理を実施する。その後、Lysis Buffer for Legionella Ver.2（製品コード 9183）またはLysis Buffer for Legionella（製品コード 9181）を用いてDNAを抽出し、CycleavePCR Legionella (16S rRNA) Detection Kit（製品コード CY240）を用いたリアルタイムPCRに供することで、レジオネラ属菌のLC EMA-qPCR法による生菌選択的な検出ができる。

令和元年9月19日に、厚生労働省医薬・生活衛生局生活衛生課長通知「公衆浴場における浴槽水等のレジオネラ属菌検査方法について」（薬生衛発0919第1号）が発出された。
これは、水質基準の項目の一つであるレジオネラ属菌の検査方法につき具体的な手順を示したもので、定量可能な迅速検査法（遺伝子検査法）としてLC EMA-qPCR法とqPCR法が収載された。
その中で、LC EMA-qPCR法の用途については、「迅速検査法のみで［レジオネラ属菌の］^＊水質基準に適合しているか否かを判断する場合は、生菌の遺伝子を定量的に検出する方法（LC EMA-qPCR法）を用いる」と記載されている。

【注記】
別売のControl Test Kit (Viable Bacteria Selection) （製品コード CY290）と併せて使用することで、Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズを用いたEMA処理が、検体由来成分による反応阻害などを受けることなく正しく行われたかどうかを確認することができる。
Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズの試薬コンポーネントには反応確認用のプラスミドDNAがあらかじめ混合されており、検体に対するEMA処理が正しく行われると、このプラスミドDNAも同時に修飾され、PCR増幅できない状態になる。従って、EMA処理を行った検体に対して、このプラスミドDNA上の領域をターゲットとするPCR増幅を行うことで、EMA処理操作の成否を確認することができる。

Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCR
[製品コード 7730（50検体分）、製品コード 7730S（25検体分）]

	製品コード 7730			製品コード 7730S
1．	Solution A-leg（LC）		625 μl×2	625 μl
2．	Solution B-leg（LC）	＊	200 μl×4	200 μl×2

＊ 光による化学反応により物質性状が変化し、核酸修飾能が減衰するので、遮光に留意すること。

Solution A-leg（LC）
レジオネラ属菌のLC EMA-qPCR法に至適化した核酸修飾反応促進試薬である。EMA処理操作の成否を確認するためのプラスミドDNAを含む。
Solution B-leg（LC）
レジオネラ属菌のLC EMA-qPCR法に至適化した選択的膜透過性色素（EMA）を含む溶液である。

Legionella LC Medium Base Ver.2（製品コード 9017）
Legionella LC Medium Base Ver.2　93.52 ml

【サンプル調製（サンプル濃縮）】
【液体培養】

【EMA処理】
【DNA抽出】
【リアルタイムPCR】

---

遺伝子検出・検査　関連試薬の選択フローをご利用ください

分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

「遺伝子検査（食品・水質・家畜他）」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。