マイコプラズマ対策ガイド

細胞培養のマイコプラズマ対策は万全ですか?

マイコプラズマ汚染の確認の重要性

マイコプラズマは培養細胞や培地などの汚染菌としてよく知られ、汚染率は15%以上であることを示す報告もあります1、2)。マイコプラズマの感染は細胞の増殖抑制や細胞膜の性質変化、タンパク質やDNAが置換する可能性など、様々な影響を及ぼすと言われており3)、実験結果に多大な影響を及ぼします。よって実験を行う前にその感染の有無を知ることは非常に重要です。

マイコプラズマとは?

  • 自己増殖能をもつ最小の原核生物。大きさは0.2 μm~0.8 μmであるため、通常のフィルターで除去できない。
  • 細胞壁をもたず細胞膜のみであり、ペニシリン系抗生物質は無効。ほとんどの抗生物質に抵抗性があり、除去することが困難。
  • 培養細胞と共存して増殖する。光学顕微鏡での観察は不可能であるため、汚染されても気付きにくい。

参考文献:

  1. Report of Mycoplasma contamination in Japan.
    Arihiro Kohara, Azusa Ohtani, Yutaka Ozawa, Setsuko Shinoda, Tohru Masui, Hiroshi Mizusawa
    Tiss. Cult. Res. Commun. (2007) 26: 159-163.
  2. Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention.
    Drexler H.G., Uphof C.C.
    Cytotechnology (2002) 39: 75-90.
  3. Interaction of mycoplasmas with host cells.
    Shlomo Rottem
    Physiol Rev (2003) 83: 417-432.

  4. 実験をする人物細胞の継代ごとなど、定期的にマイコプラズマの検出を行うことをお勧めします!

マイコプラズマ検出試薬

迅速かつ簡便に検出可能なPCR法による検出試薬をラインナップしています。培養法に比べて検出に要する時間の短縮が可能です。

培養上清のダイレクトPCRも可能
リアルタイムPCR法
CycleavePCR Mycoplasma Detection Kit

エンドポイントPCR法
TaKaRa PCR Mycoplasma Detection Set
電気泳動像

再生医療等製品の品質管理向けの製品はこちら
(第十八改正日本薬局方マイコプラズマ否定試験に準拠)

参考例:細胞培養時に気をつけたいポイント

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