cDNAの未知の5'領域を高効率でクローニング

5'-Full RACE Core Set

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR 6122 6122 5'-Full RACE Core Set
  • バルクなど特別対応可能
10回 ¥42,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

本製品は、RACE(Rapid Amplification of cDNA End)法を用いてmRNAの5’部分の増幅を行うためのCore Setである。mRNAから完全長のcDNAを得ることはきわめて重要であるが、非常に困難であることが多い。このような場合、得られたcDNAの情報をもとにさらに上流や下流をクローニングする方法がRACE法である。本製品を用いることにより、inverse PCRを利用して未知の5’末端領域を増幅し、5’-RACE法を効率よく行うことができる。本製品はRNAからのcDNA合成、およびcDNAのコンカテマー化(あるいは環状化)に必要なすべての試薬を含んでいる。

内容

AMV Reverse Transcriptase XL (5 U/μl)*110 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl)10 μl
10×RT Buffer15 μl
RNase Free dH2O1 ml
RNase H (60 U/μl)10 μl
5×Hybrid RNA Degradation Buffer150 μl
T4 RNA Ligase (40 U/μl)10 μl
5×RNA (ssDNA) Ligation Buffer80 μl
40% PEG #6000200 μl
Positive Control RT-Primer (200 pmol/μl)*210 μl
Positive Control 1st Primer Pair (各primer 20 pmol/μl)*210 μl
Positive Control 2nd Primer Pair (各primer 20 pmol/μl)*210 μl
Positive Control RNA (10 ng/μl)10 μl

*1 Life Sciences Advanced Technologies社で製造されたものです。
*2 Positive Control RNAを用いて増幅するためのプライマー

保存

-20℃

各プライマーの配列

Positive Control RT-Primer 5’-(P)AAAATGACCCAG-3’
Positive Control 1st Primer Pair S1:5’-AGCGCTTGTTTCGGCGTGGGTATGGTG-3’
A1:5’-CTGGCGATGCTGTCGGAATGGACGATA-3’
Positive Control 2nd Primer Pair S2:5’-ACCTACTACTGGGCTGCTTCCTAATGC-3’
A2:5’-TAGATTTCATACACGGTGCCTGACTGC-3’

注意)上記のプライマーは、キットに含まれるPositive Control RNAを用いて増幅するためのプライマーです。

5’-RACE法を行うために本セット以外に必要な試薬

  • TaKaRa Taq (製品コード R001A/B/C)またはTaKaRa Ex Taq (製品コード RR001A/B/C)またはTaKaRa LA Taq (製品コード RR002A/B) など
  • 5’末端リン酸化RT-プライマー(逆転写反応に使用)
  • 1st PCR用プライマーペア(1st PCRに使用)
  • 2nd PCR用プライマーペア(2nd PCRに使用)

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