TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent

アデノ随伴ウイルス産生用トランスフェクション試薬
  • アデノ随伴ウイルス（AAV）、レンチウイルスを高タイターで産生
  • HEK293T細胞培養システム（接着培養および浮遊培養）に対応
  • 幅広い培養スケールで使用可能
transIT-Virusgenチラシ
製品コード メーカー
略称		 製品名 容量 価格（税別） 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報		 参考資料 カート
Takara Code
MIR6703

MIR

Mirus Bio社
 TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
取寄 労働安全衛生法 安全データシート（SDS）添付
0.3 ml ￥32,000
 説明書・データシート・ベクター情報 個
V6703
MIR6704

MIR

Mirus Bio社
 TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
労働安全衛生法 安全データシート（SDS）添付
0.75 ml ￥77,500
 説明書・データシート・ベクター情報 個
V6704
MIR6700

MIR

Mirus Bio社
 TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
労働安全衛生法 安全データシート（SDS）添付
1.5 ml ￥121,500
 説明書・データシート・ベクター情報 個
V6700
MIR6705

MIR

Mirus Bio社
 TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
取寄 労働安全衛生法 安全データシート（SDS）添付
1.5 ml×5 ￥535,500
 説明書・データシート・ベクター情報 個
V6705
MIR6706

MIR

Mirus Bio社
 TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent
取寄 労働安全衛生法 安全データシート（SDS）添付
1.5 ml×10 ￥964,000
 説明書・データシート・ベクター情報 個
V6706
MIR6710

MIR

Mirus Bio社
 TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent Sample
取寄 労働安全衛生法 安全データシート（SDS）添付
0.1 ml サンプルお申込みはこちら 説明書・データシート・ベクター情報 個
V6710S
MIR6620

MIR

Mirus Bio社
 TransduceIT™ Transduction Reagent
取寄
1 ml ￥6,500
 説明書・データシート・ベクター情報 個
V6620
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製品説明

TransIT-VirusGEN Transfection Reagentは、HEK293Tタイプの細胞へのトランスファーベクターやパッケージングベクターの導入を促進し、アデノ随伴ウイルス（AAV）、およびレンチウイルスの産生能を上げることができるトランスフェクション試薬である。接着培養、浮遊培養のどちらの細胞培養システムでも使用可能である。
TransduceIT Transduction Reagentは臭化ヘキサジメトリン（hexadimethrine bromide）溶液であり、レンチウイルスによる遺伝子導入効率の向上に汎用的に利用されている。
接着培養、浮遊培養でのAAV産生―トランスフェクション試薬の比較
図1．接着培養、浮遊培養でのAAV産生―トランスフェクション試薬の比較

TransIT-VirusGEN Transfection Reagent（reagent：DNA(vol：wt)＝2：1）、A社製品1、A社製品2、25 kDaポリエチレンイミン(PEI)を用いて、浮遊培養したFreeStyle 293-F細胞（FreeStyle F17 Mediumで培養）(A)、または接着培養した293T/17細胞 (B)にpAAV-hrGFP、pAAV-RC、pAAV-Helper (1：1：1 ratio, 1.5 μg/ml, Agilent Technologies)をトランスフェクションした。抽出したウイルスをHT1080細胞に感染させ、48時間後にGFPの発現をフローサイトメーターにより測定した。
Functional titerはGFP陽性細胞が20％未満となるウイルス希釈率より求めた。エラーバーは3ウェルの標準偏差を示す。

接着培養、浮遊培養でのレンチウイルス産生－トランスフェクション試薬の比較
図2．接着培養、浮遊培養でのレンチウイルス産生－トランスフェクション試薬の比較

TransIT-VirusGEN Transfection Reagent（reagent：DNA(vol：wt)＝3：1）、A社製品1、A社製品2、25 kDaポリエチレンイミン(PEI)を用いて、浮遊培養したFreeStyle 293-F細胞（FreeStyle F17 Mediumで培養）(A)、または接着培養した293T/17細胞 (B)にpLKO.1-puro-CMV-TurboGFP transfer vector、MISSION Lentivirus Packaging Mix（1：1 ratio, 1 μg/ml）をトランスフェクションした。培養上清を0.45 μmフィルターで濾過後、8 μg/ml TransduceIT存在下で293T/17に感染させ、72時間後にGFPの発現をフローサイトメーターにより測定した。
Functional titerはGFP陽性細胞が20％未満となるウイルス希釈率より求めた。エラーバーは3ウェルの標準偏差を示す。

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AAV産生時の培養スケールの検討
図3．AAV産生時の培養スケールの検討

異なる培養容器、培養液量で浮遊培養したFreeStyle 293-F細胞（FreeStyle F17 Mediumで培養）(A)、または接着培養した293T/17細胞 (B)に、TransIT-VirusGEN Transfection Reagentを用いてpAAV-hrGFP、pAAV-RC、pAAV-Helper (1：1：1 ratio, 1.5 μg/ml, Agilent Technologies)をトランスフェクションした（reagent：DNA(vol：wt)＝2：1）。抽出したウイルスをHT1080細胞に感染させ、48時間後にGFPの発現をフローサイトメーターにより測定した。
Functional titerはGFP陽性細胞が20％未満となるウイルス希釈率より求めた。エラーバーは3ウェル/フラスコ/ディッシュの標準偏差を示す。

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▶ 遺伝子導入試薬 選択ガイド（Mirus社）

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アデノ随伴ウイルス（AAV）実験（ベクター作製～ベクター精製）キットのモニター結果のご紹介

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