レンチウイルスベクター作製

• レンチウイルスベクターでは神経細胞等の非分裂細胞にも遺伝子導入可能！
• タカラバイオ製pLVSINベクターを利用いただけます
• 安定発現細胞作製も承ります

• レンチウイルスベクターを一過性に産生、ウイルスベクターを含む培養上清をろ過
• Lenti-X qRT-PCR Titration Kitを用いたリアルタイムPCR法によるウイルスベクター溶液中のウイルスRNAのコピー数を算出

プラスミドDNA調製

• 目的の遺伝子を挿入した発現プラスミドDNA作製
• 挿入遺伝子のサイズ、挿入遺伝子（接続部位を含む）の塩基配列を確認
  ※pLVSIN-CMV、pLVSIN-EF1α Vectorを使用します。

ネオマイシン耐性コロニー検出法による力価測定

• ネオマイシン（G418）による薬剤選択後、薬剤耐性コロニーを検出し、感染力価を測定
  ※ネオマイシン耐性コロニー検出法の標的細胞には、ヒトHT1080細胞を使用いたします。ウイルス力価として得られる数値は、ウイルス液1 mlあたりのネオマイシン耐性コロニー形成能を示します（Neomycin colony forming unit/ml）。

レンチウイルスベクターによる遺伝子安定発現細胞株作製

• レンチウイルスベクターの作製
• 標的細胞のセットアップ、レンチウイルスベクターによる遺伝子導入
• 薬剤耐性となった目的遺伝子導入プール細胞の調製
• リアルタイムPCRによる目的遺伝子の発現確認

レンチウイルスベクターの大量調製（ご希望のスケール）

ウイルスベクターの簡易濃縮（約100倍まで）または超遠心分離による精製（VSV-Gシュードタイプウイルス）

＊1 培養のスケールアップや精製方法など、ご相談により作業内容の変更が可能です。

＊2 目的遺伝子2種としてプラスミドDNA調製が2件発生する場合、調製費用が2件になります。

• レンチウイルスベクター液　約10 ml×2種類、参考タイター　10⁷～10⁹ copies/ml
• 作業報告書

• 以下のフォーマットにご記入のうえ、電子メールにてこちらへご送付下さい。
  
  • ウイルスベクター作製受託依頼書（Excel）
• 以下の手続きの後に実際のサービスを開始します。
  
  1. 挿入遺伝子に関する情報を開示ください。 ＜遺伝子情報書式用紙 ver.7＞
     タカラバイオの遺伝子組換え実験安全委員会への申請に必要な情報（遺伝子産物の性質、塩基配列等）をお知らせいただきます。
     電子ファイルに必要事項をご記載後、メールでお送りください。フラッシュメモリやCD-R等の媒体での郵送も受け付けます。
     なお、配列情報の郵送、メール送信の際には情報漏洩に充分ご注意ください。（弊社では責任を負いかねます）
     情報の扱いには十分注意を払っております。また、情報開示にあたり、秘密保持契約を必要とされる場合はご用意いたします。
  2. タカラバイオの安全委員会において、開示いただいた遺伝子情報をもとに、必要とされる物理的封じ込めレベルを判断し、折り返しご連絡させていただきます。
     P2レベル以下で扱うことができない遺伝子の場合、サービスをお断りすることになります。

• 本作業で作製したレンチウイルスベクターを商業目的で使用される場合には、個別にライセンス契約の締結が必要となる場合があります。
• レンチウイルスベクターの取り扱いは、挿入されている遺伝子の全塩基配列が既知で、かつ、その遺伝子が毒性あるいは病原性等を示さず安全であると判断できる場合に限りP2レベルで扱うことができます。本サービスでは、P2レベルで扱うことのできる場合のみ、ご依頼をお受けしています。
• お客様よりご提供いただいたサンプル・情報および納品物の複製物は、別途期限を定めている場合を除き、業務終了後3ヵ月を経過すると順次廃棄いたします。ご了承ください。