アデノ随伴ウイルス（AAV）ベクター作製

• 血清型1、2、5、6から目的にあったAAVベクターを選択可能
• タカラバイオ独自のAAVベクター抽出法により高純度ウイルスベクター液を作製
• 10¹² vg(vector genomes)以上の高力価ウイルスベクターをご提供

アデノ随伴ウイルスベクター作製キットAAVpro Helper Free System（製品コード 6230：AAV2 など） を用いて、目的遺伝子を搭載した血清型1、2、5、6のアデノ随伴ウイルスベクターを、ヘルパーウイルスを使用せずに安全に作製いたします。
AAV2ベクターの作製には力価向上効果のあるmiRNAの発現カセットを含むpRC2-mi342プラスミドDNAを使用しています。また、タカラバイオ独自のウイルスベクター抽出法により、高力価、高純度のアデノ随伴ウイルスベクターを作製いたします。

CRE Recombinase発現AAVベクター、LacZ発現AAVベクターについても専用のアデノ随伴ウイルスベクター作製キットAAVpro Helper Free System（AAV2-CRE Recombinase）（製品コード 6652）、AAVpro Helper Free System（AAV2-LacZ）（製品コード 6655）などを用いて作製いたします。

アデノ随伴ウイルスベクターを用いた遺伝子導入法は、以下の利点を持ち、多くの遺伝子導入実験に利用されています。

1. 拡散防止措置P1の施設でも取扱いが可能
2. 増殖／非増殖のいずれの細胞にも遺伝子導入が可能
3. 免疫原性が低く、動物個体への遺伝子導入に最適
4. 非分裂細胞にて長期間の発現が可能

■チラシをご覧ください。
ウイルスベクター作製サービス

ステップ毎にご注文いただけます。

1. アデノ随伴ウイルス（AAV1、2、5、6）ベクターの作製
   
   • pAAV-GOIプラスミドDNA、pRCプラスミドDNAおよびpHelperプラスミドDNAをHEK293細胞またはHEK293T細胞へトランスフェクション
   • タカラバイオ独自の抽出法により、凍結融解法や超音波破砕法と比較して高純度かつ高効率にAAVベクターを抽出
   • 培養細胞への感染実験（in vitro実験）を行うために十分な10¹² vg以上のウイルスベクター液を調製
   • AAVpro Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2（製品コード 6233）を使用し、アデノ随伴ウイルスベクターゲノムの両末端に存在するITR（Inverted Terminal Repeat）をターゲット配列としてAAVゲノムを定量
     ※タカラバイオ取扱いベクター以外を使用する場合は、別途ご相談ください。
2. アデノ随伴ウイルス（AAV1、2、5、6）ベクターの精製
   
   • AAVpro Purification Kit (All Serotypes)（製品コード 6666）、AAVpro Purification Kit（AAV2）（製品コード 6232）、アフィ二ティークロマト、超遠心法を組み合わせたウイルスベクター液の精製
   • 動物個体への投与実験（in vivo実験）を行うのに十分な10¹² vg/mlのウイルスベクター液の調製
     ※TCID50（50％ Tissue Culture Infections Dose）法による感染力価の測定も可能ですので、ご相談ください。

【オプションサービス】
プラスミドDNA調製

• 目的遺伝子を挿入した発現プラスミドDNA（pAAV-GOI vector）を作製^＊1
• 挿入遺伝子のサイズ^＊2、挿入接続部位の塩基配列を確認
  ＊1 各セロタイプのAAVpro Helper Free System（製品コード 6673、6230、6650、6651）に含まれるpAAV-CMV Vectorを使用
  ＊2 挿入可能な遺伝子長は2.5 kbまで
• ウイルスベクター調製用プラスミドDNAの大量調製

・プラスミドDNAの構築からの場合	プラスミドDNA	3 μg以上
・アデノ随伴ウイルスベクターの作製からの場合	各種プラスミドDNA	2 mg以上