供与細胞またはtotal RNAから、TCRα、TCRβ受容体領域について
SMARTer Human TCR a/b Profiling Kit v2を用いてシーケンスライブラリーの調製を行い、次世代シーケンサーを用いて塩基配列を解析します。目的の解析領域に応じて、NovaSeqまたはNextSeqでの解析提案が可能です。得られた塩基配列をもとに多様性の解析を行います。
■サービス詳細は技術資料をご覧ください(閲覧にはWEB会員ログインが必要です)。
オプション サンプル調製
以下の点にご注意の上、解析サンプルを調製してください。
送付物 |
サンプル量 |
濃度 |
液量(目安) |
純度 |
OD260/OD280 |
OD260/OD230 |
total RNA (T細胞) |
300 ng以上 |
20 ng/μl以上 |
15 μl以上 |
1.6以上 |
total RNA (全血・組織由来) |
3 μg以上 |
150 ng/μl以上 |
20 μl以上 |
1.6以上 |
組織検体 |
100 mg以上 |
― |
血液検体 |
全血 3 ml以上 |
― |
※対象はヒト由来検体のみとなります。
※末梢血、組織等にてご依頼の場合は、別途RNA抽出費用を申し受けます。
※血液検体の場合、ヘパリンを含む採血管は使用しないでください。
※組織は採取後速やかに-80℃で保存し、十分な量のドライアイスを入れて弊社へご発送ください。
迅速な凍結保存が困難な場合は、RNA
laterに浸漬するなど、RNAが分解しないようにして保存してください。
シーケンスライブラリーの作製の際には、サンプル中のT細胞由来のtotal RNA量が重要となります。
末梢血単核細胞以外の検体につきましては、以下の検体中のおよそのT細胞の存在比を目安に必要サンプル量をご準備ください。
検体種別 |
T細胞の存在比の目安 |
セルソーター等で単離されたT細胞 |
>90% |
末梢血単核細胞(PBMC) |
40~60% |
全血 |
20~40% |
リンパ組織 |
40~60% |
その他組織 |
<10% |
■サンプル送付容器について
・RNAサンプルは1.5 mlチューブでご送付ください。0.5 mlチューブ、PCRチューブ、8連チューブでの提供はご遠慮ください。
24検体以上の場合は、96 well plateでご送付ください。プレートで送付いただけない場合は、納期が延びる場合がございます。
※プレートは弊社より提供可能(無償)です。ご希望の方はお問い合わせください。
<推奨プレートおよびシール>
・Eppendorf twin.tec full-skirted 96-well PCR plates(Eppendorf社, No. EP-0030128.648)
・タイタースティックHCフィルム(WATSON社, No. 547-KTS-HC)