製品説明
PrimeScript RTaseは、M-MLV(Moloney Murine Leukemia virus)由来のReverse Transcriptaseをベースにタカラバイオが独自に開発した新規逆転写酵素で、cDNA合成の最大の阻害要因である逆転写酵素自身のRNAへの非特異的結合を軽減し、さらに逆転写プライマーに対するプライミングの特異性を向上させた新しいタイプの逆転写酵素である。この2つのユニークな特長と本酵素の有する強いディスプレースメント伸長活性により、RNAにとってダメージの少ない42℃の反応温度で、複雑な構造のRNAや長鎖のRNAに対しても極めてバックグラウンドの低いcDNA合成が可能である。本酵素は、長いcDNAの調製や完全長cDNAの割合が高いライブラリー作製に最適である。
保存
-20℃
濃度
200 U/μl
形状
20 mM |
| Tris-HCl, pH7.8 |
100 mM | NaCl |
1 mM | EDTA |
1 mM | DTT |
50% | Glycerol (v/v) |
添付試薬組成(保存:-20℃)
5×PrimeScript Buffer(cDNA合成用)
250 mM |
| Tris-HCl, pH8.3 |
375 mM | KCl |
15 mM | MgCl2 |
活性の定義
Poly(rA)・oligo(dT)12-18を鋳型/プライマーとして、37℃、10分間に1 nmolの[3H]dTTPを取り込む酵素活性を1 Uとする。
活性測定用反応液組成
50 mM |
| Tris-HCl, pH8.3 |
75 mM | KCl |
8 mM | MgCl2 |
10 mM | DTT |
20 μg/ml | (rA)n・(dT)12-18 |
0.5 mM | [3H]dTTP |
0.1% | NP-40 |
品質管理データ
起源
組換え体大腸菌で発現、分離精製
用途
- 1st-strand cDNA合成
- cDNAプローブ調製
- RT-PCR