Viable Bacteria Selection Kit for PCR (Gram Positive)は、
Bacillus属、
Listeria属、
Staphylococcus属、
Bifidobacterium属などのグラム陽性菌を対象としてEMA-PCRを行うための前処理用キットである。本製品を用いて対象とする細菌の前処理(EMA処理)条件を最適化し、効率よく死菌由来DNAの修飾を行うことで、リアルタイムPCR(qPCR)やエンドポイントPCRにより、生菌由来DNAのみを選択的に検出する系を構築することができる。
【注記】
別売の
Control Test Kit (Viable Bacteria Selection)(製品コード CY290)と併せて使用することで、Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズを用いたEMA処理操作が、検体由来成分による反応阻害などを受けることなく正しく行われたかどうかを確認することができる。
Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズの試薬コンポーネントには反応確認用のプラスミドDNAがあらかじめ混合されており、検体に対するEMA処理が正しく行われると、このプラスミドDNAも同時に修飾され、PCR増幅できない状態になる。従って、EMA処理を行った検体に対して、このプラスミドDNA上の領域をターゲットとするPCR増幅を行うことで、EMA処理操作の成否を確認することが可能である。
1.5 mlマイクロチューブ
卓上遠心機
微量高速冷却遠心機
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
ボルテックスミキサー
【前処理操作(EMAによる死菌由来DNAの修飾)】
【DNA抽出】
NucleoSpin Tissue XS(製品コード 740901.10/.50/.250)*2
特級エタノール(>99%)
ヒートブロック(56℃および70℃で使用可能なもの)
20 mg/ml lysozyme in 20 mM Tris-HCl, 2 mM EDTA, 1% Triton X-100 (pH8.0)
【対象となるグラム陽性菌の遺伝子検出】
リアルタイムPCR検出またはエンドポイントPCR検出に必要な試薬類、プライマー、装置などをそれぞれ用意してください。
| *1 | 透明チューブの使用を推奨。弊社では下記のチューブで実績がある。
[1.5 mlチューブ(スクリューキャップ)]
1.5 mlループ付凍結保存チューブ(SARSTEDT:Code. 72.692.100)
[1.5 mlチューブ]
DNA LoBindチューブ, 1.5 ml PCR clean(Eppendorf:Code 0030108051)
|
| *2 | 使用検体に着色や濁りがあるなど夾雑物の混入が疑われる場合はNucleoSpin Soil(製品コード 740780.10/.50/.250)の使用をお勧めする。 |