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AMV Reverse Transcriptase XL(5 U/μl) | 50 μl |
RNase Inhibitor (40 U/μl) | 25 μl |
Random 9 mers (50 pmol/μl) | 50 μl |
Oligo dT-Adaptor Primer (2.5 pmol/μl) | 50 μl |
RNase Free dH2O | 1 ml |
TaKaRa LA Taq (5 U/μl) | 25 μl |
M13 Primer M4 (20 pmol/μl) | 50 μl |
10×RNA PCR Buffer*2 | 120 μl |
10×LA PCR Buffer II (Mg2+ Free) | 500 μl |
dNTP Mixture (各10 mM) | 150 μl |
MgCl2 (25 mM) | 1 ml |
Control F-1 Primer (20 pmol/μl)*3 | 25 μl |
Control R-1 Primer (20 pmol/μl)*4 | 25 μl |
Positive Control RNA (2×105 copies/μl)*5 | 25 μl |
RNAテンプレート | 全般 |
増幅サイズ | 少なくとも12 kbまでは増幅可能 |
逆転写酵素 | AMV Reverse Transcriptase XL(42~60℃で逆転写可能) |
DNA Polymerase | TaKaRa LA Taq |
RNase Inhibitor | 必要(キットに含まれる) |
1st strand cDNA 合成用プライマー |
Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer、特異的下流プライマーより選択可 |
3’-RACE法 | RT時にOligo dT-Adaptor Primer、そしてPCR時にM13 Primer M4を使用することにより3’-RACE法に対応 |
操作 | 1本のチューブ内で反応可。熱処理により逆転写酵素活性を失活させた後、PCRを行う。 |
逆転写反応におけるプライマーの選択、
RNAサンプルの調製、
操作上の注意 について
Standard Protocol
(TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV) Ver.1.1)
PCRまでが1本のチューブで1ステップで行える
RNA PCR Kit のコンポーネント
cDNAの未知の5'領域を高効率でクローニング
3'-RACE、クローニングに最適
TaKaRa Ex Taq® HSとAMV RTaseを用いた2ステップRT-PCR用キット
コンポーネントのプレミックス化で操作性がアップ