Viable Bacteria Selection Kit for PCR (Gram Negative)

汎用EMA試薬:グラム陰性菌用(EMA-PCR法)
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
7700

TKR

タカラバイオ(株)
Viable Bacteria Selection Kit for PCR (Gram Negative)
100回 ¥58,000
説明書・データシート・ベクター情報
7700
EM200

TKR

タカラバイオ(株)
LED Crosslinker 12
一式 ¥118,000
EM200
CY290

TKR

タカラバイオ(株)
Control Test Kit (Viable Bacteria Selection)
ライセンス
50回 ¥29,400
説明書・データシート・ベクター情報
CY290
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製品説明

Viable Bacteria Selection Kit for PCR (Gram Negative)(製品コード 7700)は、大腸菌などのグラム陰性菌を対象としてEMA-PCRを行う場合に適したEMA処理キットである。本製品を用いて対象とする細菌のEMA処理条件を最適化し、効率よく死菌由来DNAのEMA修飾を行うことで、お手持ちのリアルタイムPCR(qPCR)検出系やエンドポイントPCR検出系と組み合わせて、目的細菌の生菌由来DNAを選択的に検出する系を構築することができる。

【注記】
別売のControl Test Kit (Viable Bacteria Selection)(製品コード CY290)を併せて使用することで、Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズを用いたEMA処理が、検体由来成分による反応阻害などを受けることなく正しく行われたかどうかを確認することができる。
Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズの試薬コンポーネントには反応確認用のプラスミドDNAがあらかじめ混合されており、検体に対するEMA処理が正しく行われると、このプラスミドDNAも同時に修飾され、PCR増幅できない状態になる。従って、EMA処理を行った検体に対して、このプラスミドDNA上の領域をターゲットとするPCR増幅を行うことで、EMA処理操作の成否を確認することができる。

内容

(100検体分)
1.Solution A-gn250 μl×4
2.Solution B-gn*200 μl×8
*注意:
Solution B-gnは光による化学反応により物質性状が変化し、核酸修飾能力が減衰しますので、遮光に留意して保管してください。長時間操作される場合はアルミホイルなどで遮光してください。

Solution A-gn:
核酸修飾反応の促進試薬である。EMA処理操作の成否を確認するためのプラスミドDNAを含む。
Solution B-gn:
選択的膜透過性色素(EMA)を含む溶液である。

保存

-20℃

キット以外に必要な機器、試薬(主なもの)

1.5 mlマイクロチューブ
卓上遠心機
微量高速冷却遠心機
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
ボルテックスミキサー
【EMA処理操作(EMAによる死菌由来DNAの修飾)】
光照射装置 LED Crosslinker12(製品コード EM200)*1、またはLED Crosslinker*1、*2
ヒートブロック(95℃で使用可能なもの)
1.5 mlマイクロチューブ*3
【DNA 抽出】
NucloSpin Tissue XS(製品コード 740901.10/.50/.250)*4
特級エタノール(>99%)
ヒートブロック(56℃および70℃で使用可能なもの)
【対象となるグラム陰性菌の遺伝子検出】
リアルタイムPCR検出またはエンドポイントPCR検出に必要な試薬類、プライマー、装置などをそれぞれ用意してください。

*1ハロゲンランプ[岩崎電気株式会社、写真証明用アイランプ スポット(集光形)、PRS500W]、LEDランプ[東芝E-CORE LED電球、LDA7N-H]で代用できる。
*2終売製品
*3 透明チューブの使用を推奨。弊社では下記のチューブで実績がある。
[1.5 mlチューブ(スクリューキャップ)]
1.5 mlループ付凍結保存チューブ(SARSTEDT:Code. 72.692.100)
[1.5 mlチューブ]
DNA LoBindチューブ, 1.5 ml PCR clean(Eppendorf:Code. 0030108051)
*4 使用検体に着色や濁りがあるなど夾雑物の混入が疑われる場合はNucleoSpin Soil(製品コード 740780.10/.50/.250)の使用をお勧めする。

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