Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCR

レジオネラ属菌用EMA試薬(LC EMA-qPCR法)
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
7730

TKR

タカラバイオ(株)
Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCR
50回 ¥37,000
説明書・データシート・ベクター情報
7730
7730S

TKR

タカラバイオ(株)
Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCR
25回 ¥20,000
説明書・データシート・ベクター情報
7730S
EM300

TKR

タカラバイオ(株)
LED Crosslinker 30
一式 ¥200,000
説明書・データシート・ベクター情報
EM300
9017

TKR

タカラバイオ(株)
Legionella LC Medium Base Ver.2
93.52 ml ¥19,000
説明書・データシート・ベクター情報
9017
9183

TKR

タカラバイオ(株)
Lysis Buffer for Legionella Ver.2
化学物質排出把握管理促進法(PRTR法) 安全データシート(SDS)添付
50回 ¥17,000
説明書・データシート・ベクター情報
9183
9181

TKR

タカラバイオ(株)
Lysis Buffer for Legionella
50回 ¥13,000
説明書・データシート・ベクター情報
9181
CY240

TKR

タカラバイオ(株)
CycleavePCR™ Legionella (16S rRNA) Detection Kit
50回 ¥63,000
説明書・データシート・ベクター情報
CY240
CY240S

TKR

タカラバイオ(株)
CycleavePCR™ Legionella (16S rRNA) Detection Kit
25回 ¥35,000
説明書・データシート・ベクター情報
CY240S
CY290

TKR

タカラバイオ(株)
Control Test Kit (Viable Bacteria Selection)
50回 ¥35,000
説明書・データシート・ベクター情報
CY290
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【重要なお知らせ】
弊社リアルタイムPCR装置「Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ」において弊社遺伝子検査キットを使用する場合の解析条件を変更いたしました。
変更の詳細はこちら
取扱説明書およびその他製品に付随する文書は、順次更新予定です。
※LC EMA-qPCR法は、「迅速性」に加えて「生菌選択性」を併せ持つ、新しい遺伝子検査法です。

製品説明

Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCRは、LC EMA-qPCRを行う際に用いるレジオネラ属菌用に至適化されたEMA処理用キットであり、EMA処理に必要な試薬が含まれている。検水を濃縮し、Legionella LC Medium Base Ver.2(製品コード 9017)にサプリメントを加えた培地を用いて液体培養を行った後、Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCRを用いてEMA処理を実施する。その後、Lysis Buffer for Legionella Ver.2(製品コード 9183)またはLysis Buffer for Legionella(製品コード 9181)を用いてDNAを抽出し、CycleavePCR Legionella (16S rRNA) Detection Kit(製品コード CY240)を用いたリアルタイムPCRに供することで、レジオネラ属菌のLC EMA-qPCR法による生菌選択的な検出ができる。

令和元年9月19日に、厚生労働省医薬・生活衛生局生活衛生課長通知「公衆浴場における浴槽水等のレジオネラ属菌検査方法について」(薬生衛発0919第1号)が発出された。
これは、水質基準の項目の一つであるレジオネラ属菌の検査方法につき具体的な手順を示したもので、定量可能な迅速検査法(遺伝子検査法)としてLC EMA-qPCR法とqPCR法が収載された。
その中で、LC EMA-qPCR法の用途については、「迅速検査法のみで[レジオネラ属菌の]水質基準に適合しているか否かを判断する場合は、生菌の遺伝子を定量的に検出する方法(LC EMA-qPCR法)を用いる」と記載されている。

 [ ] 内の文言は補足のためにタカラバイオで追記

【注記】
別売のControl Test Kit (Viable Bacteria Selection) (製品コード CY290)と併せて使用することで、Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズを用いたEMA処理が、検体由来成分による反応阻害などを受けることなく正しく行われたかどうかを確認することができる。
Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズの試薬コンポーネントには反応確認用のプラスミドDNAがあらかじめ混合されており、検体に対するEMA処理が正しく行われると、このプラスミドDNAも同時に修飾され、PCR増幅できない状態になる。従って、EMA処理を行った検体に対して、このプラスミドDNA上の領域をターゲットとするPCR増幅を行うことで、EMA処理操作の成否を確認することができる。

内容

Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCR
[製品コード 7730(50検体分)、製品コード 7730S(25検体分)]


製品コード 7730  製品コード 7730S
1.Solution A-leg(LC)625 μl×2625 μl
2.Solution B-leg(LC)200 μl×4200 μl×2
光による化学反応により物質性状が変化し、核酸修飾能が減衰するので、遮光に留意すること。

Solution A-leg(LC)
レジオネラ属菌のLC EMA-qPCR法に至適化した核酸修飾反応促進試薬である。EMA処理操作の成否を確認するためのプラスミドDNAを含む。
Solution B-leg(LC)
レジオネラ属菌のLC EMA-qPCR法に至適化した選択的膜透過性色素(EMA)を含む溶液である。

Legionella LC Medium Base Ver.2(製品コード 9017)
Legionella LC Medium Base Ver.2 93.52 ml

保存

Viable Legionella Selection Kit for LC EMA-qPCR(製品コード 7730/7730S)-20℃
Legionella LC Medium Base Ver.2(製品コード 9017)-20℃
Lysis Buffer for Legionella Ver.2(製品コード 9183)4℃(凍結厳禁)
(Filter Columnは室温)
Lysis Buffer for Legionella(製品コード 9181)4℃

キット(製品コード 7730/7730S)以外に必要な試薬、器具、機器(主なもの)

1.5 mlマイクロチューブ
卓上遠心機
微量高速冷却遠心機
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
ボルテックスミキサー
【サンプル調製(サンプル濃縮)】
フィルターホルダー(47 mm メンブレンフィルター用)
メンブレンフィルター(直径47 mm、孔径0.22 μm;Millipore社製Code GTTP04700、Isoporeメンブレフィルターなど)
濾過びん
吸引ポンプ
ピンセット
滅菌50 mlコニカルチューブ
2.0 mlマイクロチューブ
【液体培養】
Legionella LC Medium Base Ver.2(製品コード 9017)
レジオネラ発育サプリメント(BCYE)(関東化学 (Oxoid)Code. 713251-1)
レジオネラ選択サプリメント(MWY)(関東化学(Oxoid)Code. 713255-1)

【EMA処理】
光照射装置 LED Crosslinker 30(製品コード EM300)、光照射装置 LED Crosslinker 12(製品コード EM200:終売)
ヒートブロック(95℃で使用可能なもの)
1.5 mlマイクロチューブ*1

*1 透明チューブの使用を推奨。弊社では下記のチューブで実績がある。
[1.5 mlチューブ(スクリューキャップ)]
1.5 mlループ付凍結保存チューブ(SARSTEDT:Code. 72.692.100)
[1.5 mlチューブ]
DNA LoBindチューブ, 1.5 ml PCR clean(Eppendorf:Code. 0030108051)

【DNA抽出】
Lysis Buffer for Legionella Ver.2(製品コード 9183)*2
Lysis Buffer for Legionella(製品コード 9181)
ヒートブロック(56℃および70℃で使用可能なもの)
高速冷却遠心機
*2 Lysis Buffer for Legionella Ver.2では、夾雑物をFilter Columnで除去できるためDNA溶液をより簡便に回収できる。
【リアルタイムPCR】
CycleavePCR Legionella (16S rRNA) Detection Kit Ver.2.0(製品コード CY240/CY240S)
リアルタイムPCR 用増幅装置および専用チューブ
  • Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC(製品コード TP970)
  • Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900/TP960:終売)
    解析には食品環境検査用ソフトウェア Ver.1、またはThermal Cycler Dice Real Time System Software Ver.4.0 を用いる。
  • Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700/TP760:終売)
  • Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)など

遺伝子検出・検査 関連試薬の選択フローをご利用ください

分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

「遺伝子検査(食品・水質・家畜他)」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。
注意事項
  • 本製品は食品分析および環境分析用試薬です。ヒト、動物への医療、臨床診断には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。検査結果判定により発生する問題に関してタカラバイオ株式会社は一切の責任を負いません。
  • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
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