Taq抗体と結合させたTaKaRa Taq

TaKaRa Taq™ Hot Start Version

  • ●反応用バッファー添付+dNTP
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR R007A R007A TaKaRa Taq™ Hot Start Version
  • PCR酵素 サマーキャンペーン
  • バルクなど特別対応可能
250 U ¥29,000
¥23,200
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
TKR R007B(A×4) R007B(A×4) TaKaRa Taq™ Hot Start Version
  • PCR酵素 サマーキャンペーン
  • バルクなど特別対応可能
1,000 U ¥92,000
¥73,600
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報

※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。

製品説明

TaKaRa Taqは、Thermus aquaticus DNA Polymerase遺伝子をクローニングして改変したものを大腸菌にて大量に発現させ、高度に精製した分子量94 kDaの耐熱性DNAポリメラーゼである。天然のTaq DNA Polymeraseと同じ機能を有する。
本製品で使用しているTaKaRa Taq HSは、抗Taq抗体とTaKaRa Taqを混合したもので、ホットスタートPCR用の酵素である。高温に加熱するまでは抗Taq抗体が酵素に結合しポリメラーゼ活性を抑えているため、サイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を防ぐことができる。抗Taq抗体はPCRの最初のDNA変性ステップで変性するため、特別な変性ステップは必要なく、従来のPCR条件で使用できる。

※ウラシルを含むDNAを鋳型とする場合や、チミンの代わりにウラシルを含む基質を用いた場合のPCR反応には、本酵素の使用を推奨する。

内容

(250 U)
TaKaRa Taq HS (5 U/μl)50 μl
10×PCR Buffer (Mg2+ plus)1 ml
dNTP Mixture (各2.5 mM) 800 μl

保存

-20℃

形状

20 mMTris-HCl (pH8.0)
100 mMKCl
0.1 mMEDTA
1 mMDTT
0.5%Tween 20
0.5%NP-40
50%Glycerol

添付10×PCR Buffer組成

100 mMTris-HCl(pH8.3)
500 mMKCl
15 mMMgCl2

添付dNTP Mixture*

濃度各2.5 mM
形状水溶液(ナトリウム塩)pH7~9
純度各98%以上

* dATP、dCTP、dGTP、dTTPの等モル混合物で、希釈せずにそのままPCR反応に用いることができる。

活性の定義

活性化サケ精子DNAを鋳型 /プライマーとして用い、下記の活性測定用反応液中にて74℃において、30分間に10 nmolの全ヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む活性を1 Uとする。

活性測定用反応液組成

25 mMTAPS緩衝液(pH9.3、25℃)
50 mMKCl
2 mMMgCl2
0.1 mMDTT
各200 μMdATP・dGTP・dCTP
100 μM[3H]-dTTP
0.25 mg/ml活性化サケ精子DNA

純度

●50 Uの本酵素と1 μgのλ-Hind III分解物とを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●50 Uの本酵素と1 μgのsupercoiled pBR322 DNAとを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●50 Uの本酵素と1 μgのλDNAとを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。

用途

PCR法によるDNA増幅

PCR産物について

TaKaRa Taq HSを用いて増幅したPCR産物のほとんどは、3’末端にAが1塩基付加されている。したがって、そのPCR産物をそのままT-Vector[pMD20(製品コード 3270)、pMD19(Simple)(製品コード 3271)など]にクローニングすることができる。
また、末端平滑化およびリン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることも可能である。

PCR検定

λDNAを鋳型としたPCR反応(増幅産物 8 kb)において良好な増幅がみられることを確認している。

一般的なPCR反応液量(Total 50 μl)

TaKaRa Taq HS(5 U/μl) 0.25 μl
10×PCR Buffer(Mg2+ plus)5 μl
dNTP Mixture(各2.5 mM)4 μl
Template<500 ng
Primer 10.2~1.0 μM
(final conc.)
Primer 20.2~1.0 μM
(final conc.)
滅菌精製水up to 50 μl
● 弊社では、さまざまな特長をもつPCR酵素を用意しています。
  用途に応じて選択してください。
⇒ PCR Enzyme選択フローチャート

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