pCold ベクターシリーズ｜タカラバイオ株式会社

大腸菌のコールドショック発現系

pCold™ベクターシリーズ

培養液を15℃に冷却するだけで効率よく発現を誘導
従来の大腸菌発現系に比べ、生産効率と可溶性発現が向上
バックグラウンドの少ない発現が可能
幅広い大腸菌ホストで使用可能

メーカー略称	製品コード	TaKaRa Code	製品名	容量	価格（税別）
TKR	3360	3360	pCold™ Vector Set	1 Set（各5 μg）	￥110,000
TKR	3361	3361	pCold™ I DNA	25 μg	￥53,000
TKR	3362	3362	pCold™ II DNA	25 μg	￥53,000
TKR	3363	3363	pCold™ III DNA	25 μg	￥53,000
TKR	3364	3364	pCold™ IV DNA	25 μg	￥53,000

製品説明

大腸菌コールドショック遺伝子cspAのプロモーター配列と5'非翻訳領域を利用した新しいタンパク質発現システムである。cspAプロモーターの下流には発現を厳密に制御するためのlac operatorが挿入されている。本ベクターを用いて低温で発現誘導することにより、宿主大腸菌由来タンパク質の合成が抑制され、目的タンパク質のみを高効率で得ることができる。従来の大腸菌発現系と比較して発現量や可溶性度の向上が期待できる。
pColdベクターには、TEE^*配列、Hisタグ配列、Factor Xa切断配列の有無が異なる4種類のベクター pCold I～IV、pCold TF、pCold ProS2、pCold GSTがあり、目的に合わせて最適なベクターを選択できる。
* translation enhancing elementの略称で、翻訳を促進する機能を有する。

	TEE配列	Hisタグ配列	Factor Xa 切断配列
pCold I DNA	○	○	○
pCold II DNA	○	○	×
pCold III DNA	○	×	×
pCold IV DNA	×	×	×

保存

－20℃

GenBankへの登録

	Accession No.
pCold I	AB186388
pCold II	AB186389
pCold III	AB186390
pCold IV	AB186391

特長

高い生産効率：目的タンパク質が、最大で宿主大腸菌内タンパク質の60％に達する。
発現確率の向上：T7系では発現しない多くのタンパク質の発現が可能である。
可溶性発現の向上：T7系では不溶性発現だった多くのタンパク質が可溶性発現する。^*
同位体標識に便利：目的タンパク質が、最大で新生タンパク質の90％以上に達するので効率的なラベリングが可能である。
幅広いホストで使用可能：大腸菌に由来するcspAプロモーターにより転写されるので、ほとんどすべての大腸菌が宿主として使用できる。

* 目的タンパク質の可溶化発現には、Chaperone Plasmid Set (製品コード 3340)やChaperone Competent Cell BL21シリーズ（製品コード 9120～9125）を利用したシャペロン共役発現も有効である。

使用上の注意

本製品は研究目的にのみ使用が許可されています。本製品または、本製品を利用して製造したものを商業目的で使用する際は、ライセンス付のベクター製品をご購入ください。この製品については営業企画部までお問い合わせください。また、本製品、その構成部分またはその誘導体、ならびにこれらで製造されたものを第三者に譲渡（無料配布、販売）できません。