ウイルス上清から直接、4時間でRNAタイターを測定

Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)

  • わずか4時間で組換えレトロウイルスのRNAタイターを測定
  • 同日中にウイルス回収~タイター測定および感染が可能
  • MMLVベースのレトロウイルスベクターに使用可能(※MSCVベースのレトロウイルスには使用不可)
  • 正確なタイターを得ることができるので安定した感染実験が可能
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR 6166 6166 Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)
  • レトロウイルスベクターによる遺伝子導入
100反応分 ¥47,000
¥37,600
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報

※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。

製品説明

本製品は、リアルタイムRT-PCRを利用してMLV(murine leukemia virus:マウス白血病ウイルス)ベースのレトロウイルスベクターのRNAゲノム量を測定し、力価(RNAタイター)を決定するためのセット製品である。
本セットをOne Step SYBR PrimeScript RT-PCR Kit(Perfect Real Time)(製品コード RR066A/RR086A)と一緒に使用することで、ウイルス上清から直接RNAタイターを測定することができ、サンプリングから約4時間で結果が得られる。また、MLVのパッケージグシグナル部分を増幅ターゲットにしているので、ほぼすべてのMLVベースのレトロウイルスベクターのRNAタイターを測定することが可能である。
レトロウイルスベクターの感染力価を測定する場合、指標細胞にレトロウイルスベクターを感染させ、蛍光や薬剤耐性などを利用して感染効率を測定し力価(生物学的タイター)を算出する方法が通常用いられる。この方法には少なくとも数日を要し、またマーカー遺伝子や薬剤耐性遺伝子が搭載されていないレトロウイルスベクターの場合は測定することができない。さらに、生物学的タイターを指標にMOI(multiplicity of infection)を決めて細胞に感染させる場合には、力価測定に数日以上かかるため一旦ウイルス上清を凍結して感染まで保存する必要があり、凍結融解によるウイルス力価の低下を招き、意図するものとは異なるMOIで感染してしまう場合がある。
本セットはレトロウイルスベクターのRNAゲノム量を測定するので、マーカー遺伝子や薬剤耐性遺伝子とは関係なくタイター測定することができる。また、約4時間で測定結果が得られるので、ウイルス上清を凍結することなく目的のMOIで感染させることが可能となる。
併用するOne Step SYBR PrimeScript RT-PCR Kit(Perfect Real Time)は、SYBR Green I 検出による1ステップリアルタイムRT-PCR専用のキットである。伸長性に優れ短時間の反応で効率よくcDNA合成が可能な逆転写酵素PrimeScriptと、PCR酵素として定評のあるTaKaRa Ex Taq HSを用い、反応系を1ステップRT-PCR用に至適化しており、安定した1ステップリアルタイムRT-PCRを行える。

内容

(100反応分;25μl反応系*1
Forward Titer Primer FRT-1(10 pmol/μl)50 μl
Reverse Titer primer RRT-1(10 pmol/μl)50 μl
RNA Control Template(5×108 copies/μl)10 μl
EASY Dilution (for Real Time PCR)1 ml×2
DNase I (RNase Free)(5 U/μl)40 μl
10× DNase I Buffer50 μl
RNase Inhibitor(40 U/μl)10 μl

*1 リアルタイムRT-PCR100反応およびDNase I処理20反応用

輸送

-20℃

保存

-20℃
RNA Control Templateは凍結融解の繰り返しによる分解を防ぐため、少量ずつ分注後保存することをお勧めします。Deep freezerにて-70℃~-80℃で保存してください。

セット以外に必要な試薬

One Step SYBR PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(製品コード RR066A)、またはOne Step SYBR PrimeScript RT-PCR Kit II (Perfect Real Time) (製品コード RR086A)

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注意事項
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